湾里区海藻糖

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(二)通过葡萄糖发酵制备G-6 -a
转化菌株TB2bl -44中已含有B2作启动子的表达盒,再经质粒pG丨)71 (该 质粒含有gdhA启动子和潮霉素抗性基因作标记基因的表达盒)转化得到双转化 体(double transfonrnin丨),从中选择产率较高的双转化体TB2bl - 44 - GD4、 -GD5、-GD6、-GD7在MDFA优化培养基摇瓶培养后达到最高的表达水平
反应条件:50g/L淀粉、20?/L甜菊苷、900U环鋼精珀松基梓移臻/g淀粉,PH6.0, 50^, 200r/min, 反应时间24h。
①甜菊苷的甜度约为蔗糖的200倍;
Sarroch Theemsilp等还根据分子组成计算了分子质苗:。奇异果素的氨基酸部 分的分子质量为21257u,糖组分约占13.9%,因此总分子质鱼为24600U (约 25ku),该值是由SDS - PAGE估测的分子质世28000u的88%。对于奇异果素分 子质量,若采用的测定方法或样品不同,结果也不同。在尚未得到纯样品时,根 据粗样品采用不同方法测得的奇异果素分子质迸均约是25ku的2倍。如用SDS -PAGE测定的未还原奇异果素的分子质谊为43kii,约是根据氨基酸组成及糖类 成分计算的分子质萤25ku的2倍。奇异果素的粗提物用0. 5mol/L NaCl从Sepha- dexG-75柱洗脱后,发现分子质世为52ku处的组分具有变味活性。在无DTT 的SDS-PAGE中,在431oi处有一条宽带,而奇异果素还原后,在28ku处有宽 带。天然奇异呆素用低角度激光散射(low angle laser light scattering)测定的分 子质量为90ku。这些结果表明天然粗奇异果素是25ku-肽的二聚体,纯奇异果 素娃该肽的四聚体,有可能杂质使得奇异果素二聚体难以聚合成为四聚体,并发 现奇异果素的纯四聚体和天然二聚体都有变味活性。
天然提取的仙茅蛋白有甜味。lOjunoiyL仙茅蛋白的甜度与0.2moI/L蔗糖 相当,即其甜度是等量蔗糖的550倍。仙茅蛋白还具有将酸味变成甜味的特 性。在嘴里含仙茅蛋白3min,其甜味消失后,用柠檬酸或维生素C都能诱导 出强烈的甜味。lOpimol/L仙茅蛋白经0. 1?20.0mmol/L的柠檬酸诱导产生相 当于0.35mol/L蔗糖的甜度,甜味可以持续lOmin。它和奇异果素不同,其甜 味消失后,喝水也能产生甜味,如口含lOjxmoL/L仙茅蛋白后,由水产生的甜 度与0.2m?l/L蔗糖的甜度相当,甜味能持续约5min。这说明某些唾液中的物 质抑制了仙茅蛋白的甜味,去除这些物质后可使甜味冋复。NaCI溶液与水类 似,0.5nu>l/L的NaCI也能诱导甜味,而lnmiol/L的(:8(:12或MgCl2不能使仙茅 蛋白恢复甜味。由于唾液中含有lmm0L/LCa2+,因此有可能唾液中Ca2<和/或 Mg2+抑制了仙茅蛋白的甜味,而水可以去除唾液中的CaCl2,从而恢复了它的 甜味。 甜菊苷带有轻微的类似薄荷醇的苦味及一定程度的涩味,味觉特性要比甜菊 双糖苷A差些。随着产品纯度的提高,甜菊苷的苦涩味冇所减轻,图4-3所示 为甜菊苷与蔗糖、甘草甜素在等甜度条件下味觉分布的对比情况,从中可以看出 除f持续的后味外,甜菊苷的口感类似蔗糖。有些文献上提到的部分配方,目的 都是为了改善甜菊苷的味觉特性,掩盎其不良后味,所用的配料包括氨基酸、结 晶果糖、蔗糖和葡萄糖酸内酯等。甜菊苷与甘草甜素-?起使用可起到相互改善n 感的作用,与阿斯巴甜、甜蜜素或安赛蜜混合也有协同增效作用,但与糖铕混合 时口感的改誇甚微。 Kohmura和Ariyoshi等通过Fnioc策略用固相合成法合成了马槟榔II,合成 步骤是:

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