务川县果葡糖浆
第3种合成法得率较高，其合成路线如图2-19所示。该法的特点：①实现了完全彻底的区域专一性缩合反应。②使用新的天冬氨酸衍生物N -硫代羧酸酐（L - A8p - NTA)。③在3个步骤内完成合成全过程。- a-Asp PheOMe (阿斯巴甜)+ p - Asp PheOMe (阿斯巴甜的十异构体>图2 - 18以AT -苯氧羰箪-L-天冬氨酸酐作为天冬氧酸衍生物的阿斯巴甜合成路线图2 - 19以L -天冬软酸-W -琉代羧酐为天冬氨酸衍生物的阿斯巴甜合成路线
①蔗糖C-4位羟基的构型对维持蔗糖分子的甜味很重要，因为半乳蔗糖没 有甜味而4 -脱氧蔗糖仍具有甜味。但蔗糖C -4位羟基经氣原子取代而转变为 氣代半乳蔗糖构型时，却对增甜作用具有重要意义，因为半乳蔗糖的衍生物都非 常甜。
由美国NutraSweet公司开发的阿斯巴甜（Aspartame),是目前有大景供应的 高品质强力甜味剂的典型代表，全世界共有100多个国家批准使用。其甜味纯 正，没有异味，甜味特征几乎与蔗糖一样。阿斯巴甜的问世并付诸实践，为食品 工业的低能量化作出了重大贡献。可口可乐公司由于使用了阿斯巴甜，才成功地 推出髙品质的健怡可乐（低能量型）。
在大多数均匀的非水溶性有机溶剂中，可以用固体酶或经活化的聚乙烯乙二 醉修饰的酶进行肽的酶法合成^
lg5 (甜度）=0. 194/+1.472<10-2尸-3.357& (2-31)
从植物中分离得到的Brazzein有几种结构，其中主要构型中的末端氨基酸 是焦谷氨酸（pGlu)[围5-24 (1)]0另一构型除末端没有该氨基酸外，其 余均相同，称为de8-pGlul -Brazzein [图5-24 (2)]t它的甜度是主要构型 的Brazzein的2依。按des - pGlul - Brazzein的氣基酸序列采用大肠杆菌优选 密码子合成的基因如图5-24 (3)所示。合成的Bra^ein基因若直接克隆至 质粒 pET-3a、pET-9a、pET - 1 la 和 pET - 16b 得到的 Brazzein 表达水平均 很低，只有pET-3a和pET-9a得到少量可溶的Brazzein。pET载体通常能使 外源可溶性蛋白如葡萄球菌核酸酶表达，葡萄球菌核酸酶与Brazzein的显著不 同是葡萄球菌核酸酶的氨基酸数目>100，且没有半胱氨酸或半胱氨酸含S很 低。若采用两种基因融合生产目的蛋白融合体的表达水平较髙，因此将 Brazzein合成基因插人葡萄球菌核酸酶表达系统。该策略经大肠杆菌生产鸟类 卵黏蛋白区证实很成功。
总的说来，具有高效甜味的二肽化合物在分子结构上不仅必须具有符合一定 距离的两性离子，能增强其甜味的疏水基团（X)还葙要处于生甜团（AH-B) 附近的合适位置。而具有甜味的二肽化合物在水溶液中的构象一般呈现L-型或 延展型。此外，二肽分子三维模型中的D区域处若能被某一基团填满，或者二 肽化合物带有的两个芳香环相互靠近，产生较强的分子内作用，都能显著提高二 肽分子的甜度。
从图4-7可以看出，虽然加酶量不同，但反应一段时间后，转化反应趋向 平缓。增大酶量可加速达到转化平衡，但不能改变这种平衡；对各底物转化速率 比较发现，甜菊苷（S)的转化速率较快，其他糖苷转化速率较慢，只有在S基 本转化完成时才发生显著转化。因此当酶谊较少（<800U/g甜菊苷）时，在所 用反应时间内，转化未达到平衡，S的转化起主导作用。从转化底物来源看，当 加酶量较少时，主要为甜菊苷（S)进行转化，其他组分的转化萤较少。当酶届： 增加时，S的转化量增加较少，而其他组分的转化较显著。减少一半加酶虽同时 延长一倍反应时间的转化结果不如短时间但高加酶虽的结果，这可能是由于糖转 化过程中存在抑制作用。
