市中区二氢查耳酮
(五）酵母嗦吗甜的折叠复性
Yutaka Masuda等对奇异果素的cDNA序列进行克隆并测序。测序发现奇异 果素前体由220个氨基酸组成，其中前29个氨基酸构成了一个信号序列。由奇 异果素的d)NA序列推导出的氨基酸序列与纯奇异果素直接测定的氨基酸序列间 有一个氨基酸不同。从cDNA序列分析得到的129位氨基酸为Trp，而经Edmaii 自动降解法测定为Ser。Northern印迹分析显示在RichtMla dulcifka授粉3周后， 编码奇异果素的mKNA就在果实中表达了，并只出现在果肉中。另有报道采用 免疫学方法即用奇异果素抗体检测奇异果素，在授粉8周后才观测到奇异果素。 这两个结果的差别可能是因为奇异果素蛋白质合成时间和奇异果素的mRNA表 达时间不同或是因为奇异果素基因的表达结果的翻译后修饰受到严格的调控。
Iwamura的结论认为立体空间参数和带电参数是甜度的主要影响W子，而 Heijden等人和MiyashUa等人的结论认为立体空间参数和疏水性参数是1：要的影 响因子。显然，他们的结论并不-致，丨wamiira认为这种差异是由于Heijden忽 略了带电因素引起的。然而，应用QSAR分析法分析带有一定可变异性结构的大 基团时，这种差异经常会存在。QSAR分析结果，往往还与被选择的具体化合物 有关。例如对某些化合物來说，丨wanmra分析使用的Sterimol参数就与疏水性有 关，故可用lgP (分配系数）来代替。另外，通常认为充分伸展的构象是二肽 化合物的最佳构象，所以忽略了构象方面的任何影响，这也影响了分析结果 的精确性。
发酵生成的G - 6 - a必须在特定酶的作用下从蔗糖中转移果糖基单元，才 能最终生成S-6-a。已知蔗糖合成酶可以合成蔗糖，但它却不能合成S-6-a。 而蔗糖-6 -磷酸盐合成酶尽管可以合成蔗糖-6 -磷酸酯，但蔗糖磷酸酯化物由 于对氣化反应不稳定而不能作为C -6位羟基的保护基团，因此该酶也不适宜在 蔗糖的单基团保护中应用。葡糖基转移酶如环状糊楮葡糖基转移酶，因不能高效 地将中.糖基团转移到果糖上，而不能用来形成蔗糖和蔗糖酯化物。此外，菊粉酶 (Inulinase)也不能生成S-6-a。虽然将蔗糖6 -果糖基转移酶作用于蔗糖和 G-6-a可以获得低得率的S-6-a,但它却要求极大过量的蔗糖参与反应，且 易造成聚合产物和水解产物占优势地位，因此也不适宜用来合成S-6-a。
总之，世界各地的生物试验结果及许多人体食用调丧观察，结果表明：
四、利用环糊精葡糖基转移酶改性甜菊苷
图5 - 15 莫奈林表达盒构建
的出现几率，但很明显比正常狗的病变几率大。
AH、B、X甜味三角理论，是目前用来解释甜味分子构效关系最为有效的理论体 系。以该理论为指导并结合计算机模拟技术，对甜味分子的AH、B、X生甜团进行 分子识别，可以在分子水平上成功解释三氣蔗糖等作为强力甜味剂的结构本质。
另一方面，分子内氢键对提髙甜味化合物甜度的间接贡献还表现在：如果甜 味分子的AH基团在形成分子内氢键中扮演受氢体的角色，则可以大大增强AH 基团在和甜受体B基团发生氢键键合时作为H供体的供H能力，从而使甜味分 子与甜受体的结合更为紧密，并最终导致甜度的增加。相反，如果甜味分子的B 基团在形成分子内氢键中扮演氢供体的角色，也会出现相同的效应。例如在 4'，6^-二氣蔗糖中，该化合物的疏水性因氣替代而大大增加，并因C-T位上 羟基仍和C-2位上羟基保持分子内氢键连接而使后者受氢能力大大增强，因此 它的甜度可达到蔗糖的3500倍。卤代蔗糖普遍都能建立这种形式的氢键，有些 化合物如三氣蔗糖在二甲亚砜溶液中也存在上述氢键。
