剑河县山梨糖醇
/ \ / \ , 0=C OH +flS0,^? 0=C O. (n-l)S0j
阁5-3 带嗦吗甜基因的质粒图 注：在大扬杆菌中选择性标记为Wa.在酵母中为fcu2-rf;在醉母中2-micron、ori Y和PAT153中的 oW 分别给解母和大肠杆两提供了复制功能。
图3 - 46丨、6^-二氣蔗糖和1'-氣蔗糖衍生物的合成
经RNA印迹分析知tha基因在各转化体中的转录水平，比对照<4. nidulans的 芦-肌动蛋白的髙。双转化体TB2bl -44 -GD5的嗦吗甜基因转录水平最高， B2-嗦吗甜融合mRNA转录大小为1.9kb，与预计结果相同。以pcbC为启动子 的TCTh -2转化体的表达盒中该DNA片段对应的B2基因5,端只有105bP而不 是其他表达盒中的615bP,因此转录的B2-嗦吗甜mRNA较小（1.4kb)。狹线 印迹分析发现在转化体TGDTh-4、TB2bl -44、TGP -3中的嗦吗甜mRNA水平 在24~48h内最商。转化体TCTh-21 (启动子为pcbC>在整个发酵过程中的表 达水平都很低。
图2 -2所示为阿斯巴甜的2种分解途径，图2 - 3所示为主要的分解产物。 干燥的阿斯巴甜稳定性很好，只有在极端高温条件下（>15(TC)才会发生环化 作用，分解率可用阿斯巴甜转化成DKP的数里來表示。在105T、120T和 150T下干燥阿斯巴甜的稳定性如阁2 -4和表2 - 1所示。
Osladin 是 1971 年由 Herout 等人从水龙母科（Polypodiaceae)植物 Polypodi- am vulgare L提取出的一种皂角苷，甜度为蔗糖的3000倍。与Osladin结构相似 的 Polypodosides A 和 B，则是从水龙骨科植物 Polypodium glycynhiza D. C. Eaton 的根状茎中分离出的。这种植物产于北美洲，俗称“甘草蕨” （Ucorice fem)。 Polypodosides A楚P. glycynhiza的主要甜味成分，在糖苷配基C - 3位上连接1 个新橙皮糖（2-0-a-S-P比喃鼠李糖基-芦-S-n比喃木糖）单元。Polypodosides A的糖苷配基与OsUdin糖苷配基的厶〃-衍生物相?致。
质粒pCLRM216、pRMll、pUMll的转化体，在lOmLYPD培养基中培养后, 均能产生莫奈林。凝胶定虽扫描表明，奐奈林在pUMll转化体中的表达世，超 过可溶蛋白的50%。以141基因为探针对转化体进行DNA印迹分析，测定 pCLKM216的整合拷贝数为10?丨丨，PRM丨丨为12~丨8，pUMll为20?22。经 DNA印迹分析，确走pKMH和pUMll中没有细菌序列。
然而，纽甜的实际消耗量会比这些估计的数字要小。当今市场上除阿斯巴甜 外，还有甜蜜素、安塞蜜、糖精钠等其他甜味剂。而许多产品混合使用了两种或 更多的甜味剂，而不是单一的添加阿斯巴甜，因此，纽甜的实际消耗最将会少于 在阿斯巴甜消耗世的基础上所作的预测。
