濂溪区蔗糖素

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濂溪区蔗糖素

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奇异果素存在于果浆,不溶于水。曾有研究用含有高碱性化合物如鲑精蛋白 (Salmine)或精胺的碳酸盐缓冲液(PH10.5)进行提取,这样容易导致变味活 力的下降,而且溶解了多种很难去除的深色物质,无法得到高纯度的样品。奇异 果素能用0. 5mol/L酸性NaCI溶液提取,这样得到的奇异果素在酸性pH中很稳 定,并且提取液无色。Sarroch Theerasilp和Yoshie Kurihara开发了奇异果素的提 纯工艺:冻干的果浆中的活性成分经0.5mol/L NaCI酸性溶液溶解抽提后用 (NH4)2S04分级沉淀,沉淀再经CM - Sepharose离子交换色谱和CcmA - Sepha- rose 4B柱提纯。用该方法得到的奇异果素纯度非常髙,得率为20g冻干果浆提 取得到36mg产品(表5-18)。
要对嗦吗甜甜度进行精确的定量测定通常比较困难,因为这是个主观参数, 它受pH、浓度、温度及芄他成分的存在与否所影响。1981年,Higginbotham等 人报道了有关嗦吗甜的甜度、甜味特性及其随pH、热和其他组分的影响情况。 (-)动物对嗦吗甜的感觉
图4 - 12所示为甜菊苷和挤压膨胀淀粉比例,对转葡糖基得率及环糊精积累 链的影响。挤压膨胀淀粉为50g/L,甜菊苷在10~150g/L变化,最大得率时的 混合比为20:50 (甜菊苷:淀粉质量比>。此后,随甜菊苷浓度增大,得率降低, 这可能是因为受葡糖基供体及酶的限制。甜菊苷浓度增大时,环糊精浓度从 21.2g/L —直降至7.4g/L。因此甜菊苷与挤杻膨胀淀粉质爾比选用0.4: 1.0 为好。
图1 - 34 T1R2 - T1R3受体的结合部位注:两个钴合非蛋A质甜味剂的不同大小的活性位点,一个位于TMD的钴合甜蜜素的部位,另一个 位于站合蛋质的外部“横形”部位
增加C-f取代基的大小对甜味的增强有积极作用,取代原子半径越大,甜 度越强。4,-碘-4,r, 6^-三氣蔗糖衍生物比蔗糖甜3500倍,而4,丨',4#, 6,-四溴蔗糖衍生物的甜度是蔗糖的2200倍,C -4'取代基从氣原子到溴原子, 随着原子半径增加,甜味大约增加50%。
(1)用于表达单链典奈林的质粒结构
果素。首先,导入重组奇异果素基因,构建重组奇异果素的表达质粒,并在表达 质粒中插人KEX2切割位点;然后,将表达质粒导人如orrzoe,获得30 个产重组奇异果素的转化株。选择产量最高的菌株进行大规模培养,培养时间为 3d。Western印迹分析确定了培养基表面有重组奇异果岽的存在。结果还显示, 在非还原条件下,60ku处有一条宽带,301O1处仅有一条校糊的带;而在还原条 件下,60ku处的带消失,30ku处的带却变宽。这些结果与两个30ku单体在非还 原条件下形成60ku的二聚体的事实相符。重组奇异果素的产量估计为2mg/L培 养基,纯化重组奇异果素的产S娃0.8mg/L培养基,所得的单体重组奇异果素 和二聚体重组奇异果素的分子要比天然奇异果素的大。对N42、186Q突变体的 N端糖基化位点的分析结果清楚地表明,这是由于所得糖蛋白的糖链部分质里有 所不同而造成的。
Vilsmeier试剂是一种较好的氣化试剂,其优点表现在制备容易和选择性较 好,它可安全有效地氯化蔗糖分子4、r和6#位,理论得率可达80%以上。 Vilsmeieri^剂是由无机酸氣化物与化学式为R2NCOX的W,W - 二烷基胺(如二 甲基中酰胺、二乙基乙酰胺)反应制得,其中X代表氢原子或甲基,R代表烷 基。通常使用的无机酸氣化物有五氣化磷、光气和氣化亚砜等。Vilsmeier试剂可 以直接在氣化反应体系中生成,但最好在使用前预先制备。
过髙浓度的纽甜可降低膳食的可口性(尤其是对大鼠和小鼠而言),试验动 物在体重高峰期间,与对照组比较时出现了轻度、持续地食物消耗减少(图 2-53)。而在一个较大的纽甜剂量范围内,动物的食物消耗量减少、体重降低 和体重增长减慢没有剂量依赖关系(图2-54)。这类与膳食的可口性有关的影 响在其他物质的毒理学试验中同样可以观察到(包括具有很觅味逬的其他非营 养类增甜剂),并非是纽甜所独有的。当一种的食物具有充足的营养,但是可口 性变差时,动物只吃少量食物仍会保持适当的营养。因此当大鼠面对可口性较差 的食物,它们仍会食人少量:,这种由于摄人食物减少所导致体重改变的现象并不 是副作用。然而,这种情况对安全性试验的结果有不利影响,因此食物的可口性 在安全性试验中是一个重要的考虑因素。
治理等方面有着不可比拟的优点,是比较适宜的生产方法,但目前也仍然存在需 要克服的难题。

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