宁远县三氯蔗糖

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宁远县三氯蔗糖

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已知TCK只有在亲水的溶剂中才能高度溶解,但在保证酶解反应能得到 必要的水的前提下,a-半乳糖苷酶却被证明在与水不互溶的有机溶剂中, 最稳定并具有最高的活力。这个矛盾,可以通过使用被含水缓冲液预饱和的 有机溶液时得以解决。研究发现,高水混溶的溶剂如二氣六环、丙酮、甲醇 和四氢呋喃等,即使使用高达30%的含水缓冲液进行预饱和,也不支持 a-半乳糖苷酶的水解反应。但在含水缓冲液预饱和的正丁醉、甲基异丁基 酮和乙酸乙酯三种溶液中,TCR的溶解度均达到50%以上。这些溶剂同时 也支持a-半乳糖苷酶的活力,只是三者对三氣蔗糖的溶解性存在很大的差 別,如表3-9所示。
Kondo等人曾尝试构建一 SCM质粒并在C— idilis中生产SCM。他们把 SCM基因插入由产脘假丝酵母(C. utUis)克隆来的GAP基因的启动子和终止子 片段之间。通过这种方式,他们获得了高产虽的SCM,表达水平高于总可溶性 蛋白的50%。他们还尝试克降带S. cerevisiae GAPDH启动子的SCM基因用来生 产SCM。然而,所得的产最水平很低,仅为总可溶性蛋白的5%左右。美国一专 利公开了利用P. pastoris生产SCM的方法。首先将合成的SCM基因克隆于含有 S. cerevisiae a -因子分泌信号和GAPDH启动子的PGAPZa -载体,然后将构建的 质粒转化成P.P^tori5GS115,最后通过菌株对Zcocin的阻抗性,对转化株进行 筛选。观察发现所分泌的.1:组英奈林为一条12kji的带。SDS - PAGE分析表明, 通过该方法可获得约10g/L的SCM。这些SCM经纯化后可引起甜味。
1.生甜团的分子识别早先在考虑Kier-Shallenbei?模型的尺寸范围和蔗糖的分子结构后,人们认 为蔗糖分子内有两种可能的三角形生甜团系统:即厂-OH (AH)、2-0 (B)、 4-H (X)和 3,-OH (AH)、2-0 (B)、4-H (X),它们均是以顺时针方向排列的。怛这种安排 只能证明丨? - OH/2 - 0和3# - 0H/2 - 0在充当蔗 糖生甜闭中AH、B基本单元上的正确性,却不能 说明为什么蔗糖C-l'、C-4'、C-6,位上的羟基 被氣原子取代后均能使甜度显著增加。
(五)棉轩糖水解法
(-)L41基因的改造
三氣蔗糖,是目前唯一已产业化的一种蔗糖氣代衍生物,甜度是蔗糖的600 倍左右,甜味特性非常接近蔗糖,溶解性好,稳定性好。综观国际上有关=氣蔗 糖的制备方法,概括起来共有以下5种:
表S-19 仙茅蛋白提纯工艺
一、甜叶菊的甜味成分
研究人员猜测,Neoculin特有的在B11和B12之间的C端环,可能在甜味产 生和味道修饰作用中起一定的作用。在连接/S-链的其他环中,Neoculin特有的 氨基酸序列主要位于四个环——L2-3、L4-5、1^-7和19-10中。尤其在 NBS中,位于12-3、L4-5和L6-7三个环的六个碱性残基于分子表面组成一 个大碱性区域,这一特征使得Neoculin表面的静电势分布明显有别于植物凝集素 中的。研究人员猜测,这个结构群有可能参与了 Neoculin的甜味产生和味道修饰 作用。

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