剑河县甜菊糖苷
Okahala和Ijirt)将嗜热菌蛋白酶偶合到尼龙胶囊上，胶囊表面经戊二醛处 理接上(氨甲基）-苯乙烯，旗核内缓冲液PH7。在40弋，反应物 Z-Asp6mmol/L, PM)Me300mmOl/L都溶于氣仿，用固定化酶催化进行分批反 应，每次反应2h。该反应特点是其酶催化所需的水都由囊核供给。
图丨-33所示为MNEI和Brazzein的内部（与受体接触的部分）和外部（暴 露与溶剂的部分）的比较。MNE丨和Brazzein的等电点分别是9.0和6. 7。如图 1 -33所示，Brazzdn的负静电势大部分集中在其外部表面
其中，TpTpCpGpApC 部分是Asp-Phe 的密码子，磷酸化后2个核苷酸链以部 分重香模式进行融合，形成较长的双链 DNA分子（图2-28)。该DNA分子有 重复序列和缺口，缺丨〗经T4DNA连接 酶融合形成带2 ~ 500个含12个核苷酸 的基本单元的连续共价结构，然后用限 制性内切酶Taq该融合的质粒在50代内保持稳定，双链DNA在插人点上游有可控的色氨 酸启动子（丨rpE基因），将融合的质粒转移到大肠杆菌K12 HB101，在后动子
[112]、磺酸根[113]和氛基[114]取代分-羧基会导致甜味的完全丧失。用 环状同型物取代天冬氨酰的阿斯巴甜衍生物[丨丨5] ~ [120]也基本无甜味， 作为氢键受体的带电竣基氣的消失可能阻碍了与甜受体的有效接触（表2-56)。
活化受体蛋白，经过一系列相关甜味生化传导后，产生甜味刺激，然后识別 部位的极性或离子基团之间的静电作用力，将驱散甜味分子，使受体蛋白恢复R 状态。
(三）慢性毒性试验
(二）核酸酶-Brazzeiii的生产工艺
