乐安县甜菊糖
0-2之间的分子内氢键。种种迹象表明，它在水溶液中存在着丨个或多个这类 氢键，这对三氣蔗糖在酸性水溶液中特別稳定的性质起者很大的作用。
质粒pET-3a/SNase-SW转化至大肠杆菌BL21 (DE3) /pLysS菌株进行表 达。采用pLysS菌株可以消除引人前核酸酶的不利影响，更有利于核酸酶- Brazzein融合蛋白的表达。转换后在37T加人100|xg/mL阿司匹林、34jjig/mL氣 霉素的Luria培养基（LB)中培养一段时间后，加人IPTG后培养2~3h，大肠 杆菌中分子质萤23ku的融合蛋白产量达到最大，多数在内含体沉积，在16%的 Tricine凝胶中50%?70%的融合蛋白不溶。内含体蛋白经电泳凝胶提纯后，大 部分融合蛋白重新折黉(refolded),提纯纯度> 80%。经CNBi?处理后， 50%?70%融合蛋白发生解离，这说明融合蛋「丨不能完全解离。因Brazzein酸性 较强，p/约5.4，而核酸酶碱性较强，p/9.4，因此融合蛋白解离后用阳离子交 换色谱即能分离产物。纯化得到的重组Brazzein具有较高纯度及正确的分子质量 (6.4ku)0解离后得到的肽链与^-pGlul -Brazzein序列相同，甜度是植物提 取Brazzein的2倍，与从植物中分离得到的如-pGlul - Brazzein甜度相当。已 研究表明蛋白质只有在折垒正确时才具有甜味，未折垒(unfolded)或折奋错误
由于甜蜜素特性良好，因此曾广泛应用在食品加工上，主要是和糖精一起作 为无能世甜味剂而加以使用。此外，甜蜜素还是一种有用的风味增强剂，可用来 提高柠橡果汁的表观糖酸比。
一、蔗糖的甜味理论
早在1931年，Uridel和Uvieille就报逬了他们用猪、兔和公鸡进行的急性靡
增加C-f取代基的大小对甜味的增强有积极作用，取代原子半径越大，甜 度越强。4,-碘-4，r, 6^-三氣蔗糖衍生物比蔗糖甜3500倍，而4，丨'，4#， 6,-四溴蔗糖衍生物的甜度是蔗糖的2200倍，C -4'取代基从氣原子到溴原子， 随着原子半径增加，甜味大约增加50%。
(四）纽甜结晶特性及相应晶体的制备
[166]的一个非对映体构象介于Fn和F|之间，具有甜味。顺式烯烃同型物
