城西区爱德万甜
图2-24中，实线和虚线分别表示了不同a值和底物浓度的组合时，G、 与pH的关系。在计算时，因P?2。值很小故用0.02计，因此水的分配对得率 的影响可以忽略不计。图中只幽了 a =丨，Z - Asp和PheOMe = 80mmol/L时的 Yaqy其他情况下Z-ASp-PheOMe在水相的得率很小。由图可知，达到最大平 衡得率时水相pH约为5,比在水溶液合成达到最大得率时的pH低。当《增大 时，则反应物的非离子形态增加，从而L增大。PheOMe和Z - Asp浓度增加都 能使L增大，但增加PheOMe浓度还提髙了合成速率因而效果更好。当pH在
五羟黄fW-3-乙酸觔 乙fit萆 H (2R, 3R)
蔗糖那种独特而又特別令人满意的甜味，似乎不能用葡萄糖和果糖基之间简 单组合来说明，这两个糖基可能在固定倾斜角度方向上形成分子内氢键。当用氣取 代羟基时，发现它的甜度增加了数百倍，这明显是由于几种不同类型氢键复杂的相 互作用的结果。吡喃葡萄糖基的c-2羟基起AH作用，而B则是呋喃果糖基 c-r的氣取代基团。甜度大幅度增加的原因，在于以椅式构象为主的吡喃葡糖 残基C-4轴向取代基充当了亲油性基闭[图1-15 (1)],另一方式是把C-4 位置上的连接基团对换在呋喃果糖残基的C-f位置上C [图1-15 (2> ],这 就解释了 1'，6’ - 二氣和4, lf，6,-三氣衍生物甜度增加的原因。4，6'-三氣-4，1'，6'-三脱氧半乳蔗糖（即三氣蔗糖，SUCral08e)的情况也是这 样，因其两个生甜闭的相互增效作用，明显强化了该化合物的甜度增大效果。它 是此系列化合物中最甜的一种。在这两种情况中，分子模型表明AH、B、X系 统十分接近于Kier三角形的相互间距。
0.3g/L0以重组酵母GS115/PPIC9M/PPIC3.5kV为出发菌株，通过摇瓶水平发酵 条件优化，高甜度莫奈林的分泌表达量进一步由0.3g/L提髙到了 0.5g/L。在 30L发酵罐上采取分批补料的方式实现了重组酵母GS115/pP丨C9M/PPIC3. 5kV的 高密度发酵，高甜度萸奈林分泌表达量达2g/L。而且表达的髙甜度萸奈林分泌 到胞外，无需破碎细胞提取。诙方法提供了一条产量高、分离纯化简便、可低成 本大规模生产高甜度英奈林的新途径，为实现髙甜度莫奈林的产业化和vgb基因 在毕赤酵母髙密度发酵中的广泛应用萸定了基础。
糖楮 溏挤钠 糖W钙
本章第四节将要讨论的甘草甜及其铵盐带有明敁不愉快的甘草后味，其甜味 来得较慢，消失也较慢。当甘草甜与Manunilcm50混合时，由于发生了协同增效 作用，混合物的口感得到明显改善。Marumilon 50与甘草甜的混合物（称为 Marumilon A)存在于5%的含盐溶液中，比在水溶液中其甜味得到明显改进。表
控制下表达得到苯丙氨酸和天冬氨酸的聚合体。该聚合体可以用不同蛋白酶， 如可溶性或固定化胰凝乳蛋白酶、水溶性或固定化枯草杆菌蛋A酶Carlsberg、 可溶性蛋A酶K和可溶性蛋内酶嗜热菌蛋白酶水解得到多肽，但这些酶都不 能专一水解得到Asp-Phe。可溶性枯草杆菌蛋甶酶Carlsberg或蛋白酶K的催 化专?性不强，得到的水解产物为ASp-Phe、Phe-Asp和其他由这些二肽聚 合的低聚物；用固定化枯草杆菌蛋白酶催化得到的结果最好，水解产物中绝大 部分为Asp - Phe。
酵母生产的嗦吗甜并不全部分泌在培养基中，有很大一部分留在细胞内。胞 内嗦吗甜（thaumaternal)与成熟嗦吗甜的分子质量相同，这表明它通过内质网 进入了分泌途径，但未通过商尔基体和囊泡完成整个传输过程。胞内蛋白既无免 疫特征，也无甜味，约占总嗦吗甜的50%。
蔗糖的厂，6^-三磺酸酯可由2，4，6-三甲基苯氣化磺酰，或由2, 4，6-三异醛苯氣化磺酰制得，这样更容易，更有选择性。因为三磺酸酯的制得 不需经色谱分离而只要通过结晶就可以，而且得宇可超过50%。用苯甲酸阴离 子选择性地亲核单取代6, lf，6^-三-0-苯化物生成6-苯甲酸盐-1，6-二 磺酸盐，后者能提供可与氣阴离子起反应的T，6’-二氯化物。在更严格的条件 下可进行双取代反应制得6，6,-二苯乙酸盐-r-磺酸盐，由此可得到r-氣 化物（图3-46)。
