泗县果糖

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泗县果糖

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Kubusoside的化学结构与甜菊苷十分相似,但其甜 度仅为蔗糖的1M倍,比甜菊苷低得多。此外,
使用产物沉淀法,当L - PheOMe过贵时在水溶液反应也能有很髙的得率, 其中Z - L - Asp - L - PheOMe与L - PheOMe形成不溶性沉淀。各取底物 2?10mL水中混合,并加人10mg嗜热菌蛋ft酶,起始pH6~8,在 概保持3 ~5h可得到Z-L-Asp-L-PheOMe ? L - PheOMe白色沉淀,该沉淀 得率大于95%。研究还发现,以外消旋化合物为反应底物时,只有L-PheOMe 参与缩合反应得到产物为Z-L-Asp-L-PheOMe,但D - PheOMe也能与Z-L- Asp-L-PheOMe形成沉淀。根据这些研究结果,Tosoh公司开发了生产工艺流程 (图2-20),并在1984年完成了中试。
通过喂养大白鼠、小白鼠及猴等生物试验已对糖精的毒理问题进行了广泛深 入的研究。在单代喂养试验中,分别喂以含0.005% ~5. 000%的糖精较长时期 (24月至终身),发现糖精对白鼠血液、死亡率、体重、寿命、生长速度、心脏 收缩、血压以及心脏形状等均没影响,也没发现糖精与膀胱癌的发生有任何联 系。绝大多数的一代喂养试验均表明糖精足无毒的。然而,不久前进行的两代或 三代白鼠喂养试验中发现了第二代雄鼠身上有明显的具有统计学意义的肿痫病变 现象,这些结果已引起人们广泛的关注。
所有的高等植物均能产生黄酮类化合物,它们是食物中的正常成分。根据已 知的知识,可以认为柑橘型二氢查耳酮甜味剂无致诱变活性、致癌性、致龋齿特 性及无明显的毒性,它们很快就被排出体外,其代谢情况与天然存在的母体黄烷 酮类化合物很相似。同时由于它们的甜度大,实际使用时需要萤很小,因此即使 具毒性也不会严重影响它们的应用。
天然Brazzein的氨基酸序列缺少端蛋氨酸(甲硫氨酸)[图5-24 (2)], 因此合成基因[图5-24 (3)]的第一个密码子前引人起始密码子Met。野生型葡 萄球菌核酸酶中含有4个蛋氨酸,经CNBr解离产生的肽链会影响Brazzein的分离 纯化,因此用快速定点突变将核酸酶基因(SNase)的4个Met的密码子用Ala的 密码子替换。SNase的4个蛋氨酸转化为己氨酸(正亮氨酸)对核酸酶活性没有影 响,SNase中蛋氨酸突变为丙氨酸会降低核酸酶的稳定性。经修饰后融合蛋白中只 有一个的蛋氨酸间隔SNase和SW K [图5-25 (2)],所得的融合蛋白表达水平 高并且核酸酶具有活性。在如-pGlul - Brazzein合成基因的5'和3'端分别加上 Ndel和BamHI位点,这样就可以克隆至任一 pET质粒。通过对天然核酸酶-卵类 黏蛋白融合基因表达质粒进行改造构建新的质粒。将Brazzein合成基因(SW基 因)插人pET-3a表达系统SNase基因C-端的Ndel和BamHI位点之间,得到质 粒PET-3a/SNase-SW [图5-25 (1)]0融合蛋A转录和翻译信号由T7表达载 体PET-3a产生,蛋白质在lac启动子的控制下生产。
尽管Neoculin的总体结构和甘露醉结合植物凝集素的十分相似(见图
4,_氣_4、脱氧_1, 4, 6-三氣_1,4,6-三脱氧-<*_[)_吡喃半乳糖 苷一办-D-呋喃果聚糖是蔗糖(5%)甜度的2200倍,4f-氣-4、脱氧-1, 4,6-三氣-1, 4, 6-三脱氧-?-丨)-吡喃半乳糖苷-办-0-呋喃塔格糖的甜 味是蔗糖(5%)的205倍。两者分子结构不同之处主要在于C-4'上卤素取代 基构象(图3-57),而甜度存在10倍差别,表明C-V上卤素取代基及其立体 化学结构对甜味影响起煎要作用。随着卤素取代基疏水能力的增加,氣-4' 一脱氧_?_D-吡喃半乳糖苷_1,6-二氣-4-齒代_1,4,6_三脱氧-卢一 D-呋喃果聚糖的C-4'卤代成分甜味递增顺序为:F>CI>Br>I,因此C-4'取 代基对研究4,-脱氧-4f -卤代蔗糖衍生物结构和甜味之间关系相当重要。
第六章人工合成甜味剂
目前,研究人员已完成了对马槟榔n的初级晶体学分析,而对马槟榔n结构 测定工作仍在进行当中。研究表明,马槟榔n由两条多肽链(a链和b链)非 共价紧密地连接在一起,各链氨基酸数目分别是33、72,甜度是等质量蔗糖的 100倍。A链的大多数氨基酸为疏水性氨基酸,B链中也含有很多疏水氨基酸。 两条链中Glu和/或Gin和Arg数量较多,且两条链均不含Ser、Thr、Tyr、Met 和Lys。马槟榔II含有8个半胱氨酸,但没有发现游离巯基,因此马槟榔II虽分 子相对较小,但可能形成了4个二硫键,其高度的热稳定性可能归因于此。比较 发现马槟榔II和嗦吗甜I、莫奈林、Curculin和奇异果素的氨基酸序列没有明显 的相似性,但它和arabidopsis thaliama 2S种子储藏蛋白,尤其是2S A蛋白AT2S 间的序列有很髙的相似性,而后者没有甜味。2S白蛋白AT2S3和A链4 ~20位 氨基酸中70. 6%匹配,和B链7 ~69位氨基酸有52.4%匹配,并且这两种蛋白 的8个半腕氣酸的位置相同。不同植物如/4. fAa/iana、Brassica napus s Ricinus communis和Bert— excelsa的2S白蛋白的序列髙度相似,因此可以认为马槟 榔II是具有甜味的2S白蛋白。的2S白蛋白的小亚基(A链)的某 些序列和嗦吗甜相似,但2S白蛋白的这部分序列与马槟榔n没有相似性。
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