临沂爱德万甜
(-)甜菊双糖苷的甜味特性
二、甘草甜素的安全毒理学分析
有别于其他C族G蛋A偶联受体的是，甜味受体为异型二聚体。一些研究 人员猜测，TIRs (特别是T1R3)很有可能就是甜味受体，并且可能像其他C族 G蛋白偶联受体一样形成同型二聚体。但是，几个月后，Li等便证明了只有异型 二聚体T1H2 -T1R3才具有甜味受体的功能。T1R3的序列有20%与mGluRs的 相同。在人们发现甜味受体的时期，mGluR8是惟一一种结构已被人们至少部分 了解了的C族G蛋白偶联受体。正是人们对mGluRlN端结构的了解，促成了首 个甜味受体同源模型的建立。类似于mGhiRl，这个模型为两条T1R3链的同型 二聚体。不久后，—个类似的模型表明，T1R3的活性位点可以容纳三个甜度极 高的小分子质量分子。
后来，由于甜蜜岽在各种食品、饮料中得到广泛的应用，美国其他几家公司 也开始生产，其中包括Pillsbnry公司、Pfizer Inc公司、美国甜密素股份有限公司 和Miles实验室等。在1970年禁用前，东亚的FJ本、韩国和我国台湾省也有 生产。
已有100多个试验结果证实了三氣蔗糖的食用安全性，没发现三氣蔗糖及其 副产物的任何不利影响。即使以很髙的剂最（丨6g/kg)喂养啮齿动物终生，也 可确认其安全、无毒性。而这个16g/kg的剂萤，相当于人体每天摄取1801碳酸 饮料所包含的三氣蔗糖数摄。
奇异果素是一种糖蛋白。早期的分析认为其蛋白质部分由373个氨基酸组 成，相对分子质遗3000?42000，等电点在PH9附近。表5-14列出奇异果素的 氨基酸组成。有关多糖部分的分析结果差异大，有一种结果只检测出阿拉伯糖和 木糖两种水解单糖，含量占奇异果素总量的6.7%。另外的结果是水解共得到5 种单糖：葡萄糖、核糖、阿拉伯糖、半乳糖和鼠李糖，总含萤山 15% -21.0% ； 还有一种分析结果测出4种单糖：岩藻糖、木糖、拄雜糖和半乳糖，总含量 6.3%。如此显著的差异，很可能与样品的纯化程度有直接的关系。
由于各甜蛋白间只存在一些三肽序列相同，且它们连接抗体后就丧失了 甜味或变味特性，W此另外一些研究人员猜测一些氨基酸拉伸后参与形成能 被味觉识别器识别的结构。根据报道，仙茅蛋白分別和莫奈林、奇异果素和 嗦吗甜有2个、5个和6个相同的三肽，但免疫印迹分析结果表明，仙茅蛋 白的抗血淸只与奇异果素发生微弱的反应，而与嗦吗甜、莫奈林不发生反 应。假定这些推测的三肽是在分子表面，则它们应存在于5个完全铩露在表 面的环中：11 ~丨4、46~51、66 ~ 70, 76 -78, 106 ~ 109 0这些氨基酸序 列明显与没有甜味和变味特性的GNA不同。特别是，属于11~14、46~51 和66 ~70的氨基酸非常接近（1.50~1.60mn),能够构建一个一般的抗原 决定子（common antigenic determinant)，它能使味觉接收器失效。另外，多 肽链折叠后，仙茅蛋白的AsP71和Tyi65靠近并暴寐在表面，并且形成一个 类似于阿斯巴甜的味点。
Okahala和Ijirt)将嗜热菌蛋白酶偶合到尼龙胶囊上，胶囊表面经戊二醛处 理接上(氨甲基）-苯乙烯，旗核内缓冲液PH7。在40弋，反应物 Z-Asp6mmol/L, PM)Me300mmOl/L都溶于氣仿，用固定化酶催化进行分批反 应，每次反应2h。该反应特点是其酶催化所需的水都由囊核供给。
于是，他们对奇异果素做了定点突变实验。考虑到丙氨酸不会产生特殊的空 间和电子效应，他们用丙氨酸替换组氨酸-30和/或组氨酸-60。结果发现，所 得突变体和重组奇异果素的分子大小和糖链结构类似，并且每种突变体都如期地 以二聚体形式存在。有趣的是，感官测试结果显示，0.5mg/niL的H30A和H30、
A、B两种分子的结构总特征很相似。新橙皮苷二氢查耳酮分子整体呈“J” 字母形状，办-新橙皮糖基位于“r字母的弯曲部位，橙皮素二氢查耳酮的糖 苷配基位于“厂字母的直线部位。一些早期的研究认为二氢查耳酮的“活性” 构象（如带有甜味的）是：糖苷配基呈弯曲或扭曲状，两个芳族环的平面大约 呈90°。假如上述固体状态的构象分析结果可引申至液体状态下的分子构象，那 就说明这些早期的分析结果不对。
