延长县甘草甜素
在发酵过程中，一旦葡萄糖从介质中抽走，G-6-a的含量迅速降低。而适 当提髙葡萄糖介质的浓度，可以缩短G-6-a达到最大浓度的发酵时间。当葡 萄糖的起始浓度为4%时，G-6-a的最大得率（丨.5%)可以在3(VC保温96~ 120h后得到；如果葡萄糖的浓度高于4%，摇瓶培养中的菌株生长和G-6-a的 分泌能力均下降，而葡萄糖浓度介于1% ~4%时，G-6-a的得率变化不大, 怛低于1%时得率就会降低。
有人对此法进行改进，采用了加压合成的工艺，当原料配比（环己胺： 氨基磺酸）为4:1,反应压力为0.2MPa,反应温度为165T,反应时间为 4h,甜蜜素的产率可高达98. 1%。该方法可以克服常压法所带来的焦结或 反应速度慢的问题；也避免了使用其他高沸点溶剂所带来的纯化产品和回收 溶剂问题，具有反应平稳、副反应少、反应时间短、产率髙等优点，有工业 化实用价值。
因为脱落的天冬氨酸进人了正常的氨基酸代谢途径中，故阿力甜具有能量价 值。据测定，其能虽最大值是5.85J/g。相对于它很高的甜度，这个能萤值显然 是微不足道的。
仍在动物和人体身上对它进行了大约丨8种毒理试验。
反应体系中的葡萄糖副产物，以及约有超过40%未发生反应的G-6-a,可 以通过回收而敢新利用，吸附在DEAE-纤维素柱上的果糖转移酶，也可以通过 用O.5mol/L磷酸盐缓冲液洗脱而实现循环使用。但在反应过程中，利用树脂将
图3-11 .二:氣蔗糖与蔗糖在甜度-时间曲线方面的对比（PH7.6、20*11)
Kondo等人曾尝试构建一 SCM质粒并在C— idilis中生产SCM。他们把 SCM基因插入由产脘假丝酵母(C. utUis)克隆来的GAP基因的启动子和终止子 片段之间。通过这种方式，他们获得了高产虽的SCM，表达水平高于总可溶性 蛋白的50%。他们还尝试克降带S. cerevisiae GAPDH启动子的SCM基因用来生 产SCM。然而，所得的产最水平很低，仅为总可溶性蛋白的5%左右。美国一专 利公开了利用P. pastoris生产SCM的方法。首先将合成的SCM基因克隆于含有 S. cerevisiae a -因子分泌信号和GAPDH启动子的PGAPZa -载体，然后将构建的 质粒转化成P.P^tori5GS115，最后通过菌株对Zcocin的阻抗性，对转化株进行 筛选。观察发现所分泌的.1：组英奈林为一条12kji的带。SDS - PAGE分析表明， 通过该方法可获得约10g/L的SCM。这些SCM经纯化后可引起甜味。
一、三氣蔗糖的物化性质
NHS0,H ? MQH,), NH—SOj
氢-1，2，3-噁喷嗪-4-酮-2, 2-二氧化物粗品。反应方程式为：
