来凤县索马甜

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在第-?种机理中,糖分子接近味细胞黏膜上的离子通道激发处(ion channel triggering site),打开离子通道(离子载体),迫使一束钠离子流或钾离子流流进 或流出细胞。如果这类基本离子载体数进足够多,则就能够产生足够多的离子流 来获得潜在的动作及刺激味神经细胞,那么其反应强度当然能够确定。但是,刺 激物分子与离子载体相结合的反应强度最终取决于所获得的离子流,而持久性则 与分子继续作用的时间有关。
由上看出,以三苯基膦-CC14进行氣化得率偏低,需加低级醇(如甲醉) 来终止反应,并去除剩余三苯基膦和氣化三苯基膦,操作步骤较Vil8meier试剂 多,且三苯基膦价钱较贵,相比之下ViUmeiei■试剂略胜一筹。
在非选择性培养基上培养转化细胞,在起始培养时各转化体的莫奈林表
用固定化酶催化合成肽的反应条件优化要考虑3个因素:间定化酶的稳定 性、反应时间和平衡得率。图2-25 (1)所示为a = 15时,固定在Amberlite XAD-7的嗜热菌蛋白酶稳定性、平衡得率、相对起始反应速率。裁体内部最优 pH为5~6。当PH <5时,起始反应速率低且酶不稳定;pH >6时,平衡得率急 剧下降。在大多数情况下,多孔载体内的pH只由底物和产物的缓冲作用决定, 用酸或碱中和的方法很难调节。这是阂定化酶以非水溶性有机溶剂为介质催化合]’可增加酶的稳定 性,但得率仍会逐渐下降。在CSTR整个反应器中,底物和产物浓度各处均 相等。
在反应混合物中加人一定虽:的水,不仅能降低低熔点混合物的熔点,同时 还能够使酶溶解在其中。图2 -65反映了混合物中含水萤对反应产率的影响, 反应产率随含水萤的增加而增加。在含水最较低时,由于不能很好形成低熔点 混合物而影响了反应的进行。当含水萤超过12%后,反应产率的上升幅度趋 于平缓含水■(—)/%m 2 -65混合物含水*对产率的影响 注:其中苄氣羰基-L-天冬氨酸二乙期和D-丙氨酰胺分别加入0.5mmo丨,^-狹凝乳蛋卩丨酶浓 度为丨5% 37*C下反应8h。
纽甜(Neotame, NTM)是美国纽特公司继阿斯巴甜之后,耗资8000万美元 而开发出的一种最新产品,代表者强力甜味剂研究领域的最新成就。它是根据人 体甜受体的双疏水结合位假设,在阿斯巴甜分子上结合一个疏水基团而形成的阿 斯巴甜衍生物。它可以同时作用与人体甜受体的2个疏水结合位,因此甜度大大 增加,比蔴糖甜6000?10000倍,比阿斯巴甜甜30 ~60倍。
由于酵母宿主中内源有对CYH敏感的L41基因,因此细胞中需有多个该标 记基因(3 ~ 10拷贝/细胞)以选择CYH抗性转化体。为增加每细胞中整合载体 的数目,通过从5#端缺失CYH抗性基因的启动子区域构建启动子缺失的CYH抗 性基因的质粒[图5-13 (1)]。该质粒在rDNA片段处线性化后转化至 尽管在亲代质粒PCLRE2 (图5-14)和pCLREll间没有显著的转化率差别,但 进一步的缺失会降低转化率。pCLRE15和pCLRE16的转化率约是pCLRE2的 15%,pCLRE17约是pCLRE2的0. 3%,PCLRFJ8则没有产生转化体。以丨41基 W在每细胞中的拷贝数为2计,经估计拷贝数最多的PCLRFJ7的拷贝数达到每
1983年10月在日内瓦举行的美国毒理研究会毐理讨论会与1982年10月在 英国伦敦举行的第丨丨次全国过敏物专题讨论会上,都对嗦吗甜的毐理问题做了 专门探讨,一致认为它是一种安全可靠的甜蛋A。
投人大工业生产最有效的途径仍是微生物发酵生产。近年来科学家们对真核 基W在原核中表达产物的功能进行了充分研究,认为有些基因产物尽管加工过程 不完善,只要给予合适的体外环境,它们可以重折叠成具备真核基因功能的三维 构象,从而恢复功能活性。因此选择合适的表达载体和摸索合适的体外条件去形 成有完全或部分活性的功能蛋白仍是一项有吸引力的工作。
由于各甜蛋白间只存在一些三肽序列相同,且它们连接抗体后就丧失了 甜味或变味特性,W此另外一些研究人员猜测一些氨基酸拉伸后参与形成能 被味觉识别器识别的结构。根据报道,仙茅蛋白分別和莫奈林、奇异果素和 嗦吗甜有2个、5个和6个相同的三肽,但免疫印迹分析结果表明,仙茅蛋 白的抗血淸只与奇异果素发生微弱的反应,而与嗦吗甜、莫奈林不发生反 应。假定这些推测的三肽是在分子表面,则它们应存在于5个完全铩露在表 面的环中:11 ~丨4、46~51、66 ~ 70, 76 -78, 106 ~ 109 0这些氨基酸序 列明显与没有甜味和变味特性的GNA不同。特别是,属于11~14、46~51 和66 ~70的氨基酸非常接近(1.50~1.60mn),能够构建一个一般的抗原 决定子(common antigenic determinant),它能使味觉接收器失效。另外,多 肽链折叠后,仙茅蛋白的AsP71和Tyi65靠近并暴寐在表面,并且形成一个 类似于阿斯巴甜的味点。

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