呼伦贝尔市水苏糖
0.3g/L0以重组酵母GS115/PPIC9M/PPIC3.5kV为出发菌株，通过摇瓶水平发酵 条件优化，高甜度莫奈林的分泌表达量进一步由0.3g/L提髙到了 0.5g/L。在 30L发酵罐上采取分批补料的方式实现了重组酵母GS115/pP丨C9M/PPIC3. 5kV的 高密度发酵，高甜度萸奈林分泌表达量达2g/L。而且表达的髙甜度萸奈林分泌 到胞外，无需破碎细胞提取。诙方法提供了一条产量高、分离纯化简便、可低成 本大规模生产高甜度英奈林的新途径，为实现髙甜度莫奈林的产业化和vgb基因 在毕赤酵母髙密度发酵中的广泛应用萸定了基础。
同时，控制反应条件不仅要保证单酯化衍生物占主要地位，而且要使酯化反 应尽可能地在C-6位上发生。蔗糖的酯化反应中可优先起反应的是C-6、r和 6,位羟基，各羟基反应的活泼次序是C-6、6'>r>2。因C-6聒性与C-6位 相当，得到的只能是既有C -6'位取代又有C -6位取代及少许其他位取代的单 双蔗糖酯混合物。因此，还必须通过严格控制反应条件（如蔗糖和乙酸酐的反 应比例、反应温度和时间等），以使单酯化反应尽可能地发生在蔗糖C-6位上。
图4 - 12所示为甜菊苷和挤压膨胀淀粉比例，对转葡糖基得率及环糊精积累 链的影响。挤压膨胀淀粉为50g/L,甜菊苷在10~150g/L变化，最大得率时的 混合比为20:50 (甜菊苷：淀粉质量比>。此后，随甜菊苷浓度增大，得率降低， 这可能是因为受葡糖基供体及酶的限制。甜菊苷浓度增大时，环糊精浓度从 21.2g/L —直降至7.4g/L。因此甜菊苷与挤杻膨胀淀粉质爾比选用0.4: 1.0 为好。
Undley等人报道，蔗糖C - 6和C -6^甲基化对甜味分子的甜度影响很小甚 至没有影响，而C-4甲基化蔗糖甜度明显减少，所以蔗糖分子C-4上的羟基 对甜味非常重要。而且，对甲基-a-吡喃葡萄糖苷和《，《-海藻糖的甲基化进 行研究，结果发现甲基-吡喃葡萄糖苷的单个基团甲基化并不会明显地改变母体 化合物的甜味，但分子上引人两个甲基后甜味消失甚至出现苦味，可能是由于甜 味分子亲脂性提高所造成的。相同的情况在海藻糖衍生物中也有发现，在每个六 吡喃糖苷环上引入单个甲基，甜味几乎不发生变化，而每个糖苷环上发生两个甲 基化后，甜味转变为苦味。
研究表明，乙酸稀溶液有利于6-PAS的生成，如2% ~ 10% (w/M；)。如图
醇羟基的保护应用甚广，特别是在銷体、糖类（包括核苷和核苷酸衍生物） 和甘油酯化学中。虽然很大数量的各种保护基都曾用过，但最常用的可归纳为3 类：醚类、缩醛类（或缩酮类）和酯类（图3-14)。近几年中对醉类保护基的 选择更为成熟，同时在某些悄况下为满足特殊需要还专门设计了一些基团。当评 价每个保护基时应着1：考虑3个因素：引人方便；在所需反应条件下稳定；易于 除去。
为此，人们进行了大量的研究以改进甜菊苷的甜味特性。利用酶工程法或发 酵工程法，使甜菊苷、甜菊双糖苷引人一些新的糖分子，可以得到甜味特性更好 的衍生物。0前主要的方法有：①环糊精葡糖基转移酶法（CGTase法）；②/?-呋喃果糖苷酶法（FFase法）；③半乳糖苷酶法；④微生物糖基化法。
(一）溶解度纽甜在水中的溶解度，25弋时为12.6g/L，阿斯巴甜为10g/L。达到与10% 蔗糖溶液相等甜度所要求的溶解度的倍数，即MRS 10%数值，约为740。也就 是说，纽甜的溶解度比要达到10%蔗糖溶液同等甜度所要求的溶解度大约740 倍。相比之下，阿斯巴甜的这个倍数仅约为丨9。值得注意的是纽甜以盐（如磷 酸盐）或复合物（如与/3_环糊精复合）的形式存在时，它在水相中的溶解速度 将显著增加。纽甜在无水乙醇中的溶解度很髙，25T时约为950g/L，超过阿斯 巴甜（25弋下为3.7g/L) 250倍。
宥人们去努力揭示它，因此，尽管奇异果素未能获准使用，但仍有不少科学T.作 者继续战斗在这个领域。
Shallenberger认为糖分子与甜受体AH、B系统的几何形状决定了两者间的 复合强度，甜味化合物的构象与构型对味觉刺激起取要作用。那些含有芳香残基 的刚性分子结构，如糖精和氨基硝基苯，如果它们的A—B轨道间距合适的话， 在这方面具有明敁的优势。因此，Shallenberger理论能够解释这些人工合成甜味 剂比蔗糖甜几百倍的事实。糖的甜味感觉只能持续数秒钟，说明其结合力较弱。 如果说甜味分子的立体化学结构对甜受体的配合程度决定其甜度大小的话，那么 甜味分子与甜受体相互作用的速率或许要比复合结构本身的持续性更为关键。
