湟源县海藻糖

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湟源县海藻糖

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当研究一类蛋白质的共同功能的起源时,研究人员一般都是通过比较序列 和/或三维结构来寻找这类蛋白质成员的对应部分。然而,人们至今仍未在莫奈 林、嗦吗甜、Brazzein、马槟榔、奇异果素和Curculin中发现序列同源性。通过 Clustal X得出的双序列比对结果表明,莫奈林和其他甜蛋白(嗦吗甜、Brazzein、 马槟榔、奇异果素和Curculin)的相同残基百分比为:莫奈林和奇异果素之间 23% ,莫奈林和Curculin之间仅为7%。如果把鸡蛋淸溶菌酶也考虑进去,那么, 所得的结果[图1-30 (1)]是这些蛋白质完全不存在对应性(mis-alignment): 仅有3个部位具有少许同源性。即使把序列比对仅局限在三种最甜的蛋白(莫 奈林、Brazzein、嗦吗甜>,也只能发现2个相同部位和12个具有同源性的部位 [图 1-30 (2)]。图1-30 甜味蛋白的序列比对 (I)典奈林、嗦叫甜、BraHein、4槟梅、奇异果家、仙茅蛋甶和鸡蛋淸溶菌酶的比对 <2)奂奈林、嗦吗甜和Bra/zrin的比对比较现有的甜蛋白(莫奈林、嗦吗甜和Brazzein)的三维结构,也儿乎没宥 发现它们之间存在任何的相似性。Brazzein、莫奈林和嗦吗甜三维结构的惟一共 同点是二级结构的一个小K域,即符合甜味指要求的办-折登发夹结构,这一结 构具有已在小分子甜味剂所确定的生甜团。 柚昔二氢查耳酮的最初原料柚苷在国外有市售,小批量的可通过葡萄柚皮制 得。制备时,先将葡萄柚皮与少量的50%冷甲醉溶液混合几秒钟后过滤,滤液 在冰箱中放罝数日,以使其结晶完全。然后将晶体溶于水中进行重结晶,真空干 燥后柚苷晶体的熔点由80$上升到1711。 八1^0—在朽8(^1?提出的甜二肽分子基础上,扩展了 Kaneko的氨基酸立体 化学模塑(图2-74中的IV)。在这个模型中,NH/和C0/基团连接于甜受体 上,侧链R对甜度影响很大。例如,甘氨酸(R = H)和D-丙氨酸[24] (R = CH3)只有较弱的甜味,而D-色氨酸[25] (X = H)和6-氣-D-色氨酸 [25] (X = C1)的甜度分别是蔗糖的35和1300倍。甜度的增加是由于K基团 与受体之间存在着疏水链和色散力的缘故。对于甜二肽V來说,分子下半部第 二个氨基酸占据了 IV中氨基侧链R的位罝。这样,AH-B基团仍是NH/和 C00 ,虽然其间隔要远一些,但仍在Shallenberger和Acree定义的0.25 ~ 0. 40nm范围内。IV中氨基酸手性中心基团的定位与二肽V和VI中天冬氨酸手 性中心的一样,只不过前者是D-型而后者是L-型而已。事实上V和VI中的 竣基团是侧链的一部分(VI中是R基团),这反映了立体化学分配上的变化 情况。 Goodman及其合作者应用C -端氨基酸构象强制法,详细研究了基团的大小 和疏水特性对化合物甜味的影响。碳原子上允许双取代,表2-64所示为双 取代基分别是甲基[157]、乙基[158]和环烷基(至环己基)[159]化合物 的甜度,与表2-63所示化合物甜度一样。随着C-端氨基酸大小和疏水性的增 加,并没有发现它对化合物甜味有任何大的影响。当环烷基碳原子数由6增至7 时,化合物突然由甜味转变成苦味,这说明甜味受体和苦味受体是紧密联系在一 起的。表2 -64 双取代基二肽化合物的结构与甜度 图2-8S所示的三种阿斯巴甜类似物均具有强力甜味,其中,图2-88 (1)的甜度为蔗糖的1200倍,图2-88 (2)和(3)均为二肽苄胺,甜度分别 为蔗糖的1300和1500倍。经X射线衍射和核磁共振(NMR)分析,发现图2- 88 (1)在水溶液中有六种构象,两种呈L型,另外四种呈延展型。这六种构象 均对其甜味的产生有贡献,这与图2 -87所示的二肽化合物呈味三维模型所推导 出来的结论完全吻合。 最初分离出马槟榔I和II两种组分,Liu等人进一步分离纯化,发现它有5 种同工蛋白,分别为马槟榔I、1-1、n、10和IV,原来所指的马槟榔1包括 了马槟榔丨、丨-1、in和iv。其中马槟榔n的热稳定性最高,人们对它的研究 也最多,在80T至少可保持48h甜味不被破坏,而其他同系物在80*C保持0.5h, 甜味即丧失,因而马槟榔U具有较高的开发价值。马槟榔的热稳定性(及由此 决定的甜味特性)与其他甜蛋白有较大不同,与某个氨基酸组成有关。如有研 究认为不同马槟榔类似物热稳定性的差别是由于B链47位上是精氨酸(热稳定 型)还是谷氨酸(热不稳定型)。 半乳糖基蔗糖衍生物都具有很强甜味,半乳糖基蔗糖这一概念由Hough等 人首次提出,通常卤素取代后,蔗糖衍生物C-4的构象发生翻转,从而使蔗糖 分子上的吡喃葡萄糖苷环转化为吡喃半乳糖苷环,因此称为半乳糖基蔗糖。使用 高度亲油性卤素原子,取代蔗糖葡糖基和 果糖基上特殊位罝的羟基,这些特殊位置 包括 C-4、C-\\ C-4'和 C-6、可以 使蔗糖甜味明显增强,这些位置与甜味分 子亲水基团位置对立。蔗糖可能具有两个 不同生甜团,分别为2-OH (AH) /3- 0(B)和 3' - OH (AH) /2 - 0 (B),

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