渭城区麦芽糖醇
将峰值m分在pH8、2nnn0丨/Ltt妖的嚷堪丨丨丨烷盐酸绥冲液（经Ot排气） 稀释至2(^8/011^然后在4t：保持20h
Iwamura的结论认为立体空间参数和带电参数是甜度的主要影响W子，而 Heijden等人和MiyashUa等人的结论认为立体空间参数和疏水性参数是1：要的影 响因子。显然，他们的结论并不-致，丨wamiira认为这种差异是由于Heijden忽 略了带电因素引起的。然而，应用QSAR分析法分析带有一定可变异性结构的大 基团时，这种差异经常会存在。QSAR分析结果，往往还与被选择的具体化合物 有关。例如对某些化合物來说，丨wanmra分析使用的Sterimol参数就与疏水性有 关，故可用lgP (分配系数）来代替。另外，通常认为充分伸展的构象是二肽 化合物的最佳构象，所以忽略了构象方面的任何影响，这也影响了分析结果 的精确性。
SDS - PAGE和Western印迹分析。结果表明，重组奇异果素通过SDS - PAGE处理 后具有和植物奇异果素?样的迁移率，并且它也和植物奇异果素一样地被糖甚化 了。转基因莴苣中的奇异果素含谊为33.7~43.4叫5/8鲜重。重组奇异果素具有和 植物奇异果素相似的强甜味诱导作用。但是，与多数转基闪植物的情况一样，这种 转基因窝苣在后代的表达水平并不稳定，宽组奇异果素的产量要明显降低。
通过转基因莴苣和番茄均可生产莫奈林，但两者植物所使用的启动子并不相 同。在转基因番茄表达使用的是E8启动子，这种后动子是可定向使莫奈林基因 在番茄中表达的水果专用启动子。而在转基因莴苣中表达则使用CaMV启动子， 这种启动子在许多植物器官中都具有活性。把含有莫奈林带E8启动子或CaMV 启动子的基㈥引入中即可。蛋白质从西红柿果皮或莴苣叶中提取。 对提取的蛋白质做western印迹分析和EL1SA,结果表明，在带有E8启动子和莫 奈林基因的转基因西红柿果实和带有CaMV启动子和莫奈林基W的转基因莴苣叶 中均可检测到重组莫奈林。用乙烯处理转基因两红柿，可使西红柿果皮中莫奈林 的产谊提高至23.9?^丨鲜重，诚著高于未经乙烯处理的转基因番茄。
六、甜菊苷的应用
(二）嗦吗甜与食品、饮料中某些成分的相互反应
随后研究人员扩展了对甜蜜素的研究，证明了由甜蜜素引起的甜味受体的活 化必需在具有人类形式的T1R3的存在的条件下才能得以进行。接着，通过对另 外的嵌合体和突变体研究，以及系统的丙氨酸扫描诱变，研究人员确定了在甜味 受体对甜蜜素起反应中所起作用的几个位于人体T1R3 TM K域内的残基。
为了进一步确定三氣蔗糖AHS、Bs、Xs生甜团的组成，Tetsuo Suami等人利 用计算机模拟技术进行更为细致的研究。首先假设，甜味蛋白受体是一个在 /V-末端及K?附近含有L-天冬氨酸酰胺（AH和B部位）和L-脯氨酸残基的
该表达系统以产朊假丝酵母(CandUla utihs)为莫奈林基因的宿主细胞，采 用的GAP启动子，对的核糖体蛋甶L41基W进行体外突变得到 的放线菌酮Uycloheximide, CYH)抗性基因作为标记基因，质粒构建后再线性 化，以多拷W整合至宿主染色体进行表达。
在pH9,尿素6mol/L、/?_汰基乙W200mmol/L.三紙基中烷盐酸丨OOmmol/L 的级冲液，加入嗉吗甜至丨0-20mg/mL,通氮气，37t保持3b
