井研县罗汉果苷

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井研县罗汉果苷

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单链莫奈林在高温和酸性溶液中能保持稳定。细胞抽提物经高温或酸性溶液 处理后,莫奈林仍在溶液中,而大多数宿主蛋白已发生沉淀。细胞抽提物酸性溶 液PH5.0、4.5或4.0保持12h,或501保持丨Omin,即可提取到可溶组分中的 莫奈林(图5-20)。单链奠奈林在70T或在PH3. 5时与其他蛋白一起沉淀。经
该表达系统以产朊假丝酵母(CandUla utihs)为莫奈林基因的宿主细胞,采 用的GAP启动子,对的核糖体蛋甶L41基W进行体外突变得到 的放线菌酮Uycloheximide, CYH)抗性基因作为标记基因,质粒构建后再线性 化,以多拷W整合至宿主染色体进行表达。
达水平没有区别。但是在rDNAK整合的质粒转化体,在非选择性培养基上 培养50代后,莫奈林产量明显下降,而整合点在UKA3区的质粒的转化体 中没有明显下降,见图5-19。不带萸奈林表达盒的载体一直都保持稳定, 这说明莫奈林的高产可能会导致在rDNA区粮合载体稳定性的显著下降。且 培养50代后,pUMll转化体对CYH (4(Vg/inL)保留抗性的细胞数占总细 胞数的80% -100%, pCLRM216和pRM丨丨转化体为0% ~ 30%。这些结果 表明URA3区是在C. utilis中最优多拷贝整合点。URA3栽体除能维持载体序 列稳定外,它还在转化前去除了细菌序列,这对于食品工业蛋白质生产是很 有益的。
近年來日本的Kirin公司已将莫奈林表达于产脘假丝酵母(C.u/i7/5),这在 莫奈林的开发上已跨出重大的一步。与此同时,美国FDA已批准产脘假丝酵母 (C. utUis)为“公认的安全物质”(GRAS)。这一切将使莫奈林的研究开发和商 业推广获得新的转机。
疏水结合基团X的引人成功地解释了高效甜味剂的强力效应,即所有未被 取代的糖分子都是亲水性的,与甜味蛋白受体的结合力较弱,所以不会太甜。而 通过在适当位置引人合适的疏水基团可有效增加糖分子的疏水性,从而显著增强 糖分子与甜味蛋白受体的作用力,大大提高了甜度。很显然,X疏水基团是影响 化合物甜度的一个控制因素,但并不是所有的甜味化合物都有这样的疏水部位, 因此它不是甜味的先决条件。
2.对疏水基团X的扩展Kier发现高甜度分子必有疏水性的X部位,但他认为X是一个确定位置点 (距A和B分别为0.35mn和0.55mn)的说法却没有普遍意义,实际上X固然 可以是确定接触的点,但更符合是一种多点接触的诱导效应,包括各种不同的键 合力。因此疏水部位X应该是一个完整而易变的整体结构,而不是甜味三角中 的一个明确且特殊的点。
CGTase催化转糖苷反应中,葡糖基是很好的糖基受体,而半乳糖基则不是。 因此用半乳糖苷酶催化转糖苷反应,将半乳糖基连接至甜叶悬钩子苷的19-竣 基相连的葡糖基上,再用该产物作为CGTase催化的底物,这样就可以选择性地 在13 -0H相连的葡糖基上进行转糖苷反应。
(5)限制件酶切位点缩写分别为:H, Hind丨;B. Bamll I ; S, Sal I ; X, Xba I ; N, Nco |。
在进行代谢研究的同时,人们还对它的药物动力学进行了研究。试验是在白 鼠、狗和猪身上进行的,最后也在自愿受试人身上进行。所有的受试动物和人体
表 2-41

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