会宁县阿拉伯糖
转糖苷反应中的产物变化情况
(三）酶反应的最优条件
从植物中分离得到的Brazzein有几种结构，其中主要构型中的末端氨基酸 是焦谷氨酸（pGlu)[围5-24 (1)]0另一构型除末端没有该氨基酸外，其 余均相同，称为de8-pGlul -Brazzein [图5-24 (2)]t它的甜度是主要构型 的Brazzein的2依。按des - pGlul - Brazzein的氣基酸序列采用大肠杆菌优选 密码子合成的基因如图5-24 (3)所示。合成的Bra^ein基因若直接克隆至 质粒 pET-3a、pET-9a、pET - 1 la 和 pET - 16b 得到的 Brazzein 表达水平均 很低，只有pET-3a和pET-9a得到少量可溶的Brazzein。pET载体通常能使 外源可溶性蛋白如葡萄球菌核酸酶表达，葡萄球菌核酸酶与Brazzein的显著不 同是葡萄球菌核酸酶的氨基酸数目>100，且没有半胱氨酸或半胱氨酸含S很 低。若采用两种基因融合生产目的蛋白融合体的表达水平较髙，因此将 Brazzein合成基因插人葡萄球菌核酸酶表达系统。该策略经大肠杆菌生产鸟类 卵黏蛋白区证实很成功。
(三）糖精的致癌与致突变试验
图1-35甲基-a-D -吡喃甘餺糖苷对味觉受体的端基极化 {二）基本味的相互作用
在一些甜味蛋白中，广泛的表面区域呈碱性对引起甜味起莆要作用，因此, NBS的这些碱性氨基酸群有可能对Neoculin的甜味和味道修饰作用也起着重要作 用。这些碱性氨基酸群含有两个pA为6.0的组氨酸残基。由于Neoculin在中性 pH条件下仅引起轻微的甜味，而在酸性条件下引起强烈的甜味，因此这些组氨 酸残基可能是Neoculin甜味和味道修饰作用产生的必要条件。
表4 -27 不同来源的《 -半乳糖苷醵催化甜叶悬钩子苷的转糖苷反应产物
1999年，我国有人采用原核生物偏爱的密码子合成了编码单链莫奈林的基 因，使其在大肠杆菌中得到高效表达，奂奈林达菌体可溶性蛋白的20%。在此 基础h，又对单链莫奈林基因进行定点突变，获得突变莫奈林基W，其产物甜度 是蔗糖的4500倍，较天然莫奈林甜度（是蔗糖的3000倍）有显著提髙，产量达 240mg/Lo
