镇平县高麦芽糖
即使如此，就B前来说，人工合成甜味剂还是有很大的消费市场的。除上述 五条优点外，还有一个很重要的原因就是天然甜味剂受环境、生产季节、土壤和 病虫害等诸多因素的影响，成本势必较髙，有的化学性质还不够稳定，生产量也 受限制，在经济效益上尚无法与人工合成甜味剂相竞争。因此，除非法律上绝对 禁止使用，否则在今后很长一段时间内人工合成甜味剂将继续使用，且将得到不 断的发展。人们还会不断研究开发出更新、更好的产品，以满足这方面的巨大消 费市场。
天然Brazzein的氨基酸序列缺少端蛋氨酸（甲硫氨酸）[图5-24 (2)]， 因此合成基因[图5-24 (3)]的第一个密码子前引人起始密码子Met。野生型葡 萄球菌核酸酶中含有4个蛋氨酸，经CNBr解离产生的肽链会影响Brazzein的分离 纯化，因此用快速定点突变将核酸酶基因（SNase)的4个Met的密码子用Ala的 密码子替换。SNase的4个蛋氨酸转化为己氨酸（正亮氨酸）对核酸酶活性没有影 响，SNase中蛋氨酸突变为丙氨酸会降低核酸酶的稳定性。经修饰后融合蛋白中只 有一个的蛋氨酸间隔SNase和SW K [图5-25 (2)],所得的融合蛋白表达水平 高并且核酸酶具有活性。在如-pGlul - Brazzein合成基因的5'和3'端分别加上 Ndel和BamHI位点，这样就可以克隆至任一 pET质粒。通过对天然核酸酶-卵类 黏蛋白融合基因表达质粒进行改造构建新的质粒。将Brazzein合成基因（SW基 因）插人pET-3a表达系统SNase基因C-端的Ndel和BamHI位点之间，得到质 粒PET-3a/SNase-SW [图5-25 (1)]0融合蛋A转录和翻译信号由T7表达载 体PET-3a产生，蛋白质在lac启动子的控制下生产。
两代喂养忒验表明，三氣蔗糖没有致畸性或致突变性，也不会影响动物的繁 殖力。对小鼠和猴进行的专门研究表明，三氣蔗糖和其分解产物对神经系统无影 响，对动物血液葡萄糖水平及胰岛素分泌量也无影响。
(2)去除细黹序列后的质粒pRMlI和PUM1丨的可能整合方式 注：中链奐奈林和CYHf?因的转录方向如箭头所示； 用于转化的?粒均在BglB位点断开 < 方框所示）; 限制性》切位点缩写：
盐酸、硫酸、亚硝酸钠、硫酸铜、液体 二氧化硫、甲苯、碳酸氢钠、活性炭等，
九、三氯蔗糖的应用
若以摩尔浓度为计算基准，则在阈值浓度时新橙皮苷二氢杳耳酮（n)的 甜度为蔗糖的330倍，柚苷二氢查耳酮（1)甜度为蔗糖的490倍，HDG (III) 的甜度为蔗糖的390倍。由此可见，二氢查耳酮的甜度要比糖精（300倍）和甜 蜜素（30倍）来得大。
一水-令乙?
④4、r及6'位上选择性氣化。
此外，AH、B、X甜味理论的应用也有助于人们对“相对甜味值”的更好 理解。“相对甜味值”的突出优点是，它将所有甜味物质的全部甜味特性和一种 标准甜味物质（通常是蔗糖）联系起来，并用一个具体的数值来表示，从而大 大简化了对各种甜味剂的联系和比较。但值得注意的是，由于一个甜味剂的所有 味觉属性被简单地组合成一个单独的“相对甜味值”来表示，也造成了其甜味 本质与“相对甜味值”之间存在一定的差异。
