五华区乳糖醇
⑤脱乙酰化作用，恢复剩余的羟基团，得到终产品三氯蔗糖c
这些实验结果还可探讨莫奈林的甜味活性区域。重组SCM可像天然莫奈林那样 产生甜味反应。研究人员已通过生产规模装置，利用酵母菌株AB110对SCM进 行了大规模的生产和纯化。SCM基因是被克隆于携GAPDH或ADH2启动子的 pUC栽体的。把带有ADH2启动子的菌株S于450L中试规模的发酵罐进行发酵， 最终可获得54g具有甜味的纯化重组SCM。
现在国内外对Brazzein的研究主要表现在两个方面：一是利用基因工程技术 研究Brazzein基因结构和功能的关系以及Brazzein的热稳定性问题；二是利用基 因工程技术开发这一蛋白资源。而对甜味蛋内Brazzein的研究方式主要有三种： 一是在大肠杆菌中表达Brazzein; 二是在毕赤酵母中表达Brazzein;三是利用转
(四）双酶-化学联合法（单基团保护法}
对不同内阻下场强对转化率和活细胞的影响作了研究（图5 -18)。细胞悬 浮液与1叫经Bgi fl酶切的pCLRE2混合后在电容25jjlF下进行电脉冲转化，电 脉冲后，细胞在30T添加了 lmol/L山梨糖醇的YPD培养基上培养6h。在场强 为3.75kV/cun和内阻80W1时得到最高的转化率，约为1400个转化体/jxg线性 pCLRE2。在3. 75和5. 0kV/cm和内阻6(X)、800或100011时转化率较高[图 5-18 (1)]0这些条件下细胞存活率为10%?40%，实际脉冲时间为11 ~ 17ms [图5-18 (2)]。当内阻200或400ft时，转化率低。
D.commima属于雌雄异株的草本多年生植物，原产于非洲西部、苏丹和赤 道几内亚等地。在津巴布韦、英桑比克和肯尼亚等地也有发现。但是，在津巴布 韦和莫桑比克所收集的浆果产于变种植物Leptotrichos trompin，没有甜味。
现在对蔗糖衍生化的兴趣已集中在脱氧-卤化上，这不仅因为它是合成稀少 的、在生物学上具有重要作用的脱氣糖和氨基-脱氧糖的中间物，而且还可用在 生化和医药工业上。现已有碳水化合物肉化衍生物生产，用来作为抗菌素，它具 有更好的抗菌特性和良好的化学治疗功能。
图5 -29 Neoculin甜味产生和味道修饰作用的吋能机制
疏水结合基团X的引人成功地解释了高效甜味剂的强力效应，即所有未被 取代的糖分子都是亲水性的，与甜味蛋白受体的结合力较弱，所以不会太甜。而 通过在适当位置引人合适的疏水基团可有效增加糖分子的疏水性，从而显著增强 糖分子与甜味蛋白受体的作用力，大大提高了甜度。很显然，X疏水基团是影响 化合物甜度的一个控制因素，但并不是所有的甜味化合物都有这样的疏水部位， 因此它不是甜味的先决条件。
