隆德县甜蜜素
(四）反应条件的优化
产率。
发酵完成后，为了从去除干物质的培养基上清液中有效地提取出G -6 - a, 人们试验了多种溶剂，包括甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯和1 -丙醇等。其中， 甲醇是G-6-a最有效的溶剂，但它同时也会溶解一些葡萄糖，因此要得到纯 净的G-6-a，还必须利用色谱进行进一步分离。以硅胶为固定相，用丙酮对甲 醇提取液进行洗脱可以从中分离出葡萄糖和G -6 - a两个成分并得到纯度为 80% ~85% 的 G-6-a。
1.糖分子及其衍生物的多点结合模型D-果糖属于E,、E2、E3、E4型甜味剂，见图丨-20。而D-葡萄糖属于 B,、B2、AH,、AH2、XH_、XH2 型甜味剂，见图 1 -20 和图 1 -21。
最初分离出马槟榔I和II两种组分，Liu等人进一步分离纯化，发现它有5 种同工蛋白，分别为马槟榔I、1-1、n、10和IV,原来所指的马槟榔1包括 了马槟榔丨、丨-1、in和iv。其中马槟榔n的热稳定性最高，人们对它的研究 也最多，在80T至少可保持48h甜味不被破坏，而其他同系物在80*C保持0.5h, 甜味即丧失，因而马槟榔U具有较高的开发价值。马槟榔的热稳定性（及由此 决定的甜味特性）与其他甜蛋白有较大不同，与某个氨基酸组成有关。如有研 究认为不同马槟榔类似物热稳定性的差别是由于B链47位上是精氨酸（热稳定 型）还是谷氨酸（热不稳定型）。
甜味剂的稳定性是其能否应用于食品的 非常歌要的因素。试验证明安赛蜜耐热，相对酸性质稳定（图6-24和表6-9)。
反应条件：50g/L淀粉、20?/L甜菊苷、900U环鋼精珀松基梓移臻/g淀粉，PH6.0, 50^, 200r/min, 反应时间24h。
本研究选用乙酸酐和蔗糖在吡啶溶液中低温下进行单酯化反应，以实现对蔗 糖C-6位羟基的单基团保护。研究发现，当蔗糖用最小世的吡啶（蔗糖：口比
Unilever已成功地生产出嗦吗甜II及嗦吗甜分子的前体化合物，这一杰出成 就是通过多年的努力，应用遗传工程方面的最新知识完成的。有两篇专利文献对 这种生产方法做T相当详细的描述。其中一篇描述的娃利用重组DNA技术把植 物基因的遗传信息引人大肠杆菌{Escherichia coli)细菌寄主细胞内，将“设计 好”的DNA适时移人细菌体内就可生成嗦吗甜蛋白。第?.篇描述的是重组[)NA 分子的结构，它可产出嗦吗甜分子的前体化合物。嗦吗甜D分子的氨基末端有额 外的22个氨基酸，羧基末端也冇额外的6个氨基酸。这种伸长的分子有助于微 生物细胞更易排出蛋白质，因此增加了应用时的经济效益。遗传工程的另一个任 务就是通过基W突变使嗦吗甜分子发生特种变异，以观察其对产品甜度及其他特 性的影响。然而，就H前来说，要把这些实验成果转变成商收化规模生产尚冇不 少困难。另一种适合用来生产嗦吗甜的寄主是酵母或其他无毒性的发酵微生物， 因酵母的食用历史很长，对有关管理部门以及最终消费齐来说吸引力更大些。
