秀屿区甘露醇
甜蜜素风味良好，不带异味，还能掩盖诸如糖精类人工甜味剂所带有的片涩 味，因此，它大多是与糖精一起混合使用的。例如，5mg糖梢和50mg甜蜜素混 合制成的餐桌甜味剂，其甜度与单独使用125mg甜蜜素或12.5mg糖精相等。虽 然两者间的混合比例随产品的种类不同而有很大变化，最常用的配比是10份甜 蜜素加1份糖楮:，这样两种甜味剂的甜度相等，混合使用会使产品口感变好，这 可能是由于两者相互之间能够互相掩盖对方的不良风味。
1968年，K?mfel(l等人最先发现色氣酸衍生物（Tryptophan Derivatives)的 甜味特性，当时他们观察到外消旋的6-三裉甲基色氨酸具有强烈的甜味。进一 步研究表明，这些化合物中当以S -构型存在且带有6 -氣-S -色氨酸结构时， 甜度可达到蔗糖的1000倍。作为色氨酸中间代谢产物，…-甲酰基和/^-乙酰 基犬尿氨酸的甜度大约是蔗糖的35倍，甜味明快。最近，又发现了如图6-29 所示的犬尿氨酸氣化衍生物^3- (4-氣氨茴基）-SS-丙氨酸，甜度是蔗 糖的80倍，没有明显的苦后味。
从植物中分离得到的Brazzein有几种结构，其中主要构型中的末端氨基酸 是焦谷氨酸（pGlu)[围5-24 (1)]0另一构型除末端没有该氨基酸外，其 余均相同，称为de8-pGlul -Brazzein [图5-24 (2)]t它的甜度是主要构型 的Brazzein的2依。按des - pGlul - Brazzein的氣基酸序列采用大肠杆菌优选 密码子合成的基因如图5-24 (3)所示。合成的Bra^ein基因若直接克隆至 质粒 pET-3a、pET-9a、pET - 1 la 和 pET - 16b 得到的 Brazzein 表达水平均 很低，只有pET-3a和pET-9a得到少量可溶的Brazzein。pET载体通常能使 外源可溶性蛋白如葡萄球菌核酸酶表达，葡萄球菌核酸酶与Brazzein的显著不 同是葡萄球菌核酸酶的氨基酸数目>100，且没有半胱氨酸或半胱氨酸含S很 低。若采用两种基因融合生产目的蛋白融合体的表达水平较髙，因此将 Brazzein合成基因插人葡萄球菌核酸酶表达系统。该策略经大肠杆菌生产鸟类 卵黏蛋白区证实很成功。
在饱和乙酸乙酯缓冲液中，由嗜热菌蛋白酶催化合成Z-Asp-PheOMe的反 应动力学可表示为 Z-Asp (ZA)、PheOMe (PM)、Z - Asp - PheOMe ( ZAPM) 的快速平衡机理，满足Michaelis-Memen动力学，其中Z - A叩对酶活力部位的 双侧均有亲和力，PheOMe除进行酶促反应外，同时还以?级反应速率进行非酶 促分解。ZAPM、ZA和PM浓度变化引起的结果如式（2-19)-式（2-21) 所示
与楔形模型不同的另外一个甜味蛋白部位是由Jiang等人提出的。由于人体 T1R2-T1R3对Brazzein有反应，而人体T1 R2 -小鼠T1R3的嵌合体对Brazzein 没反应，所以这些作者认为原因可能在于T1R3的半胱氨酸富集区域。他们通过 将T1R3的人体/小鼠嵌合体与人体T1R2配对，确定了人体T1R3的半胱氨酸宫 集K域中的残基536 -545是对Brazzein有反应的必要条件。
已知TCK只有在亲水的溶剂中才能高度溶解，但在保证酶解反应能得到 必要的水的前提下，a-半乳糖苷酶却被证明在与水不互溶的有机溶剂中， 最稳定并具有最高的活力。这个矛盾，可以通过使用被含水缓冲液预饱和的 有机溶液时得以解决。研究发现，高水混溶的溶剂如二氣六环、丙酮、甲醇 和四氢呋喃等，即使使用高达30%的含水缓冲液进行预饱和，也不支持 a-半乳糖苷酶的水解反应。但在含水缓冲液预饱和的正丁醉、甲基异丁基 酮和乙酸乙酯三种溶液中，TCR的溶解度均达到50%以上。这些溶剂同时 也支持a-半乳糖苷酶的活力，只是三者对三氣蔗糖的溶解性存在很大的差 別，如表3-9所示。
(7)水溶性好。
环状芽孢杆菌(Bacillus cird)的办-半乳糖苷酶能催化乳糖、甜叶悬钩 子苷的混合体系进行转半乳糖苷反应，产物结构见表4-20。其中RGaI-1中 RGal-la为主要组分，RGal-lb只有少量。
五、利用单基团保护法制备三氣蔗糖
