温江区二氢查耳酮
天然Brazzein的氨基酸序列缺少端蛋氨酸（甲硫氨酸）[图5-24 (2)]， 因此合成基因[图5-24 (3)]的第一个密码子前引人起始密码子Met。野生型葡 萄球菌核酸酶中含有4个蛋氨酸，经CNBr解离产生的肽链会影响Brazzein的分离 纯化，因此用快速定点突变将核酸酶基因（SNase)的4个Met的密码子用Ala的 密码子替换。SNase的4个蛋氨酸转化为己氨酸（正亮氨酸）对核酸酶活性没有影 响，SNase中蛋氨酸突变为丙氨酸会降低核酸酶的稳定性。经修饰后融合蛋白中只 有一个的蛋氨酸间隔SNase和SW K [图5-25 (2)],所得的融合蛋白表达水平 高并且核酸酶具有活性。在如-pGlul - Brazzein合成基因的5'和3'端分别加上 Ndel和BamHI位点，这样就可以克隆至任一 pET质粒。通过对天然核酸酶-卵类 黏蛋白融合基因表达质粒进行改造构建新的质粒。将Brazzein合成基因（SW基 因）插人pET-3a表达系统SNase基因C-端的Ndel和BamHI位点之间，得到质 粒PET-3a/SNase-SW [图5-25 (1)]0融合蛋A转录和翻译信号由T7表达载 体PET-3a产生，蛋白质在lac启动子的控制下生产。
(三）环原酸酯法（单基团保护法）
从枯草芽孢杆菌(SAtUis') NCIB 11871中分离得到的一种特异性果糖转移酶， 可以专一地将G-6-a转化为S-6-a,并获得得率较髙的S-6 - a。尽管这种特 异性果糖转移酶可能会受到G - 6 - a上乙酰基的位阻影响，但总的效果仍较为理 想。这种酶和通常所说的果糖基转移酶有关，但又有其特殊性。它不会通过重复地 转移果糖基单元形成果聚糖，而只能专一地将-?个果糖基单元转移到受体己糖单元 上得到二糖产物，这可能是W为该酶的活性中心太小以致不能容纳超过单糖大小的 糖分子受体，也可能是因为果糖基不是这种酶的最佳受体。因此，这种单糖专一性 的果糖转移酶，被定义为单糖专一性的果糖转移酶（EC2.4. 1.162)。
(-)甜味受体的发现
表4 -22 环状芽孢杆菌的-半乳糖苷酶催化
室温下安赛密很稳定，其!r：藏时间似乎是无限的。以曝光或闭光形式在室温 下存放样品长达5年以上也未见有任何分解或变化的迹象。干燥的安赛蜜即使在 100弋的髙温中存放24h,对其性质也无影响。这些事实表明，安赛蜜具有很高 的稳定性。
图2 -82 阿斯巴甜分子中天冬氨酰残基与苯丙氨酸残基的参趋构象示意图2-83 阿斯巴甜匕口丨和？…丨构象的分子模型 AH-B-X的最佳距离（0.1nm)
DMBA的精制：DMBA粗品与硫酸氢钠在醉和醚混合溶剂体系中形成不溶性的 DMBA加和物，过滤后，用少量醇/醚混合溶剂洗涤，得到的加和物在碳酸氢钠水 溶液中解析，变成纯净的DMBA。用此方法制得的DMBA可满足制备_的要求。
(四）甘草甜素的抗炎症效果甘草甜素具有抗炎症特性，但有关机理尚未完全弄淸楚。让白鼠口服甘草亭 酸，60min后再用1%的角叉菜胶注射A鼠的爪子（注射剂量0. lmL),发现甘 草亭酸能减轻由角叉菜胶引起的炎症。甘草亭酸还具有阻止由葡聚糖诱发的白细 胞向胸膜位转移的作用，但它不会抑制白鼠腹膜白细胞中前列腺素的释放和生 成，也不会改变猪肠中回前列腺素诱导产生的收缩作用。
