东湖区海藻糖
图2-81 疏水键合位与AH-B之间的距离（lOStn)
如图丨-31 (1)所示，自由态I和自由态n之间的平衡可以通过结合小分 子甜味剂（结合小分子甜味剂使自由态I转换成与自由态n结构相同的复合态) 而改变，使Q由态I向有利于形成活性态的方向转化。但是，如果可以通过另外 的方式来稳定自由态n，那么也同样可以改变形态I和形态n之间的平衡。图
初步的毒理试验和长期的食用历史，可以证明罗汉果所含的Mogrosides是安 全的，加上其良好的风味、稳定性、水溶性以及价格便宜等优点，Mogrosides及 罗汉果浸出液作为一种潜在的甜味剂有很广阔的应用前眾，值得大力开发C
供味觉研究用的理想分子或许是海藻糖。这种分子所含的两个葡萄 糖残基都是以最稳定的4c,构象形式存在的，它通过糖苷键将还原性残基异构碳 原子联系起來。这种糖分子及其衍生物的所有羟基取代基均分布在赤道平面上， 因此稳定性比较好。使用海藻糖及其相关糖分子所进行的早期研究表明，在各种 不同位置上对其进行化学改性后，只有第4位上的羟基被取代后才发现甜味被掩 盖掉。然而，这类研究的结果未必都易于辨认出，因为取代物本身还会带来污染 味（主要是苦味）。
制备三氣蔗糖的核心在于对活泼的C - 6位羟基进行保护，使之不被氣化。 所谓单基闭保护法，就是只对蔗糖分子8个游离羟基中的C-6位羟基进行专一 保护，然后直接进行选择性氛化。该方法可以使反应过程大幅度简化，但一般需 要髙效的色谱分离操作。
选用正交表U (34)安排试验，试验方案如表3-7所示。试验结果表明， 最佳反应条件为：S-6-a: Vilsmeier 试剂=丨：7 (mol/mol)； S-6-a 浓度 15%; 反应温度1201;反应时间2.5h。在该条件下进行反应，摩尔产率可达35.6%， 说明控制适当的反应条件，可提高三氣蔗糖含摄，降低其他衍生物含摄。
3.生殖和畸形学试验两代繁殖试验中，分别在雄性大鼠和雌性大鼠交配前的10周和4周就给其 饮食中添加纽甜，一直持续到大鼠交配、受孕、哺乳直至第一子代21 d断奶。然 后从第一子代中挑选出仔鼠来进行第二代繁殖，被挑选的第--子代在交配前继续 喂养10周以上添加纽甜的食物，第二子代在整个受孕和哺乳期间也持续接触纽 甜。试验中，消耗大童的纽甜的连续两代动物，并没有产生对其生殖性能、胚胎 发育、出生后发育等不同发育阶段的活动、反射、学习或身体的成熟造成任何 影响。
由于1-氣-3, 3-二甲基丁烷很容易用乙烯与叔丁基氣制得，故一般采用 该方法制备DMBA。其反应原理如图2-47所示。?12-47 乙烯与叔丁基氣制备3，3-二甲基丁醛(DMBA)的反应M程
采用电穿孔法，将质粒转至产朊假丝酵母(Candida ulUis)中。该方法较简 单并能实现Candida utUis的高效转化。对转化条件进行优化以达到最优转化率。 据研究，酵母在最优电脉冲转化率下存活率为50% -70% ,因此通过调整场强、 内阻和电容大小，使Candida utUis的存活率达10%?70%。在加了4(Vg/mL CYH的YPD平板培养基上培养C— ulUis转化体（4(Vg/mL CYH是野生塑 Candida ulilis能在YPD培养基生长的最高浓度），进行CYH抗性转化体选择。 YPD培养基组成为：2%葡萄糖、l%BaCto酵母抽提物、2%Bacto蛋白胨。由于 电脉冲导致酵母细胞膜的破裂，使细胞对渗透压更敏感，因此电脉冲处理后细胞 立即在YPD培养基上培养不形成菌落D电脉冲处理后细胞立即分散在选择性培 养基，也不能得到CYH抗性菌落，需在30弋含lmol/L山梨糖醉的YPD培养基 上预培养一段时间后，再转移至含CYH的培养基才能得到转化子。
