繁昌县甜蜜素
注：维持时间
由于到B前为止，还没有冇关奇异果素原子水平结构方面的资料，为了更好 地研究奇异果素的甜味，Antone丨la Paladino等预测了奇异果素的三维结构并应用 比较建模与分子对接技术模拟了奇异果素的二聚体和四聚体形态。
Mortierella vinac.ea的a -半乳糖苷酶，可以催化棉子糖或蜜二糖和甜叶悬钩 子苷的混合体系，进行转半乳糖基反应，产物结构见表4-24。
的甜味。例如，图6-30所示的3- <3-甲氨酰 -SS-丙氧酸的化学纺构图 基-2，4，6三溴苯）-丙酸，其甜度是蔗糖的4000倍，虽然其甜味刺激有些 迟缓，味觉略有延绵且带有一定的苦味。在这组化合物中，甜度的大小与羧烷氧 基或竣烷基团链的长短有关。三溴苯甲酰胺的部分化合物已在大鼠身上进行了急 性毒理试验，毒性程度大致与糖精和甜蜜素相当。
质粒pET-3a/SNase-SW转化至大肠杆菌BL21 (DE3) /pLysS菌株进行表 达。采用pLysS菌株可以消除引人前核酸酶的不利影响，更有利于核酸酶- Brazzein融合蛋白的表达。转换后在37T加人100|xg/mL阿司匹林、34jjig/mL氣 霉素的Luria培养基（LB)中培养一段时间后，加人IPTG后培养2~3h，大肠 杆菌中分子质萤23ku的融合蛋白产量达到最大，多数在内含体沉积，在16%的 Tricine凝胶中50%?70%的融合蛋白不溶。内含体蛋白经电泳凝胶提纯后，大 部分融合蛋白重新折黉(refolded),提纯纯度> 80%。经CNBi?处理后， 50%?70%融合蛋白发生解离，这说明融合蛋「丨不能完全解离。因Brazzein酸性 较强，p/约5.4，而核酸酶碱性较强，p/9.4，因此融合蛋白解离后用阳离子交 换色谱即能分离产物。纯化得到的重组Brazzein具有较高纯度及正确的分子质量 (6.4ku)0解离后得到的肽链与^-pGlul -Brazzein序列相同，甜度是植物提 取Brazzein的2倍，与从植物中分离得到的如-pGlul - Brazzein甜度相当。已 研究表明蛋白质只有在折垒正确时才具有甜味，未折垒(unfolded)或折奋错误
(二）结合小分子甜味剂的活性位点
注：①工艺要求添加量；②錯度等价值（通过与褒蠊产品相比而得）；③fi fit值（为TDL的倍教④甜度等价值（通过与还原糖产品相比而得〉,,
在后续的研究中，人们优化了表2-68所示的环丙基酯二肽化合物的“下 面”酯基团。这其中，以正丙基酯的二肽化合物甜度最大，苄基酯的二肽化合 物[丨78]没有甜味，这与对应的成对二甲基化合物[169]甜度为0的情况一 样。有趣的是，iV-丙基-酰胺化合物[179]并不具甜味。
4-8所示为Marumilon A在水溶液和5%盐溶液的相对甜度，表4-9所示为盐溶 液浓度变化对Marumikm A的影响。往Marumilcm 50中添加甘草甜的好处是在于 混合后两者所带有的不愉快后味均可降至不明显的程度，这样，Marumilon 50就 更接近于蔗糖了。日本将Marumilon A应用于各种食品和饮料特别是含盐食品 中，因为盐味可提高Mammilcm A的甜味，同时盐味本身也因此而明显减弱。纯 甜菊苷与甘草甜的混合物也有类似效果，但性质不及Marumikm 50好，因为前者 包含有甜菊双糖苷A。
