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沙县低聚果糖

沙县低聚果糖 五、Neoculiii的基因表达 2.淀粉虽的影响 4.非均匀酶反应体系的产物及反应机制 由于原料邻甲基苯胺来源的限制,原料成本较高,因而该法不适合于工业化 在第三种…

沙县低聚果糖
五、Neoculiii的基因表达
2.淀粉虽的影响
4.非均匀酶反应体系的产物及反应机制
由于原料邻甲基苯胺来源的限制,原料成本较高,因而该法不适合于工业化
在第三种机理中,刺激物分子不可逆地进入接近离子载体的“有序排列队” (orderly queue),这条排列队的物理长度决定了持久性。三种机理中前部分离子 载体阶段与第二种机理相同。
这一敢要发现极大地鼓舞了英国Reading大学Tate & Tyle公司和英国皇家科 学院的研究者们,坚定了进一步研究的信心。他们合成了取代程度更大的蔗糖氣 化物和与此相关的衍生物,分析鉴定了它们的甜味特性与甜度,并进行医药和毒 理学评价,其目的在于寻求一种完善的新型强力甜味剂。
质粒pET-3a/SNase-SW转化至大肠杆菌BL21 (DE3) /pLysS菌株进行表 达。采用pLysS菌株可以消除引人前核酸酶的不利影响,更有利于核酸酶- Brazzein融合蛋白的表达。转换后在37T加人100|xg/mL阿司匹林、34jjig/mL氣 霉素的Luria培养基(LB)中培养一段时间后,加人IPTG后培养2~3h,大肠 杆菌中分子质萤23ku的融合蛋白产量达到最大,多数在内含体沉积,在16%的 Tricine凝胶中50%?70%的融合蛋白不溶。内含体蛋白经电泳凝胶提纯后,大 部分融合蛋白重新折黉(refolded),提纯纯度> 80%。经CNBi?处理后, 50%?70%融合蛋白发生解离,这说明融合蛋「丨不能完全解离。因Brazzein酸性 较强,p/约5.4,而核酸酶碱性较强,p/9.4,因此融合蛋白解离后用阳离子交 换色谱即能分离产物。纯化得到的重组Brazzein具有较高纯度及正确的分子质量 (6.4ku)0解离后得到的肽链与^-pGlul -Brazzein序列相同,甜度是植物提 取Brazzein的2倍,与从植物中分离得到的如-pGlul - Brazzein甜度相当。已 研究表明蛋白质只有在折垒正确时才具有甜味,未折垒(unfolded)或折奋错误
研究发现,PFR的生产效率一般要比CSTR的髙^当两者的合成速率相同 时,CSTR内部的反应条件与PFR出口处的反应条件相同,因此此时CSTR的 Z-Asp浓度较低,固定化酶内部pH比PFR入口处稍高。试验证实在CSTR中反 应可连续进行。图2-26显示在51 = 0.95外时,反应得率为90%可持续300多 小时。用上述条件,在lm3CSTR中,用400kg湿固定化酶,可生产10〖阿斯巴 甜。尽管固定化酶用于实际工业生产阿斯巴甜还存在许多问题,但这结果说明酶 法生产很有前景。如果能在PFR中实现连续化反应,则效率将会更髙。在另一 研究中,通过降低温度至25T,并同时降低底物浓度的方法,在PFR中实现了 连续化反应,在外=1. 85/h下固定化酶柱的稳定可保持500h。
(3)以环己胺和氨基磺酸铵为原料

作者: 中国甜味剂网

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