舟曲县二氢查耳酮
提取甘草甜素时，先将甘草切细后加5倍质量的冷水浸泡2d后过滤。往滤 渣中加3倍质量的水冷浸12h，再次过滤。合并两次滤液，经蒸发浓缩并冷却 后，加乙醇在低温下放置2d后过滤，滤液蒸发浓缩后得黑褐色黏稠状抽提液。 抽提液中的甘草甜素含量为15%，干燥失重为35%以下。甘草抽提液再次浓缩 干燥后，制得粗结晶，然后在稀乙醇溶液中重结晶制得甘草甜素终产品。
(四）质粒表达
最后将L-天冬氨酸以N-苄氣苯基天冬氨酸或恶唑烷酮的形式与前两步反 应得到的D-丙氨酰胺缩合。苄氧基苯天冬氨酸溶解在多聚甲醛、对甲苯磺 酸和甲苯的混合液中，在lOOt回流lh,然后加人D-丙氨酰胺和三乙基胺在 60T下反应6h，反应结束后，反应液分别用lmol/L的盐酸和水洗，有机相用硫 酸镁干燥，过滤干燥得到阿力甜，产率为85%。
Vilsmeiei?试剂作为氣化试剂，反应温度必须髙于95T以使不活泼的V位发 生充分氣化反应，但反应温度过髙，反应时间过长，容易造成6-PAS分解或炭 化。我们对其氣化反应的温度和时间进行了系统研究，结果如图3-24所示，在 I15T下反应4h，TOSPA得率可达72. 3%。
如前所述，纽甜的平均和90%的每日消耗量是用纽甜来取代所有产品中的 阿斯巴甜来预测的，在美国这些预测值分别是0.04和0. lmg/(kg*d)，这是个 非常保守的假定。然而，在实际上用纽甜来取代所有的阿斯巴甜是不太可能的， 而许多的其他甜味剂的使用会更进一步降低纽甜的用量。因此，预测的纽甜消耗 量远低于美国FDA所制定的可接受的每日摄人量，纽甜的实际消耗量也将会少 于市场前期的估计。
KJM 性酶切点缩写：Af = 4/ B ; B = BamH I ； C = Clo I ； E : EcoR I ； H = Hind IB； Hp = W/w I : P = Pst I ； Pv = Pm 0 ; R V = EcoR V ; S s Sa n ; Sc = Sac I ; Sc D = Sac D ; X = Xba I ； XhnXho I 0
由此可见，引起受试动物半数致死的最低摄人量（根据光桥的结果为 8.2g/kg以上）也是人类可能摄人数量的1968倍以上。其计算依据是：
有研究者用葡糖基转移酶GT - 1酶催化甜 菊苷改性，该酶性能与环糊精葡糖苺酶基本相似。它对葡萄糖、蔗糖+起作用， 对麦芽糖有一定程度的转化，这说明它只对a- (1—4)糖苷键起作用。将该酶 加至甜菊苷和可溶性淀粉的混合体系中，产物为甜菊苷分子上以《_ (1—4)糖 苷键连接上麦芽糖或葡萄糖基。
图3-19 4-PAS浓度对 6-PAS得率的影响
