察哈尔右翼前旗乳糖

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1.产物沉淀法如果在竣基端、氨基端或二者同时加上适当的保护基团,则产物肽的溶解度 下降,易从溶液中沉淀析出。而沉淀物对酶催化不敏感,因而可以增大得率。在 相同胺和竣酸浓度[S。],产物溶解度为[S]且底物可溶时,平衡百分得率X 可用下式计算:
表S -5 嗉吗甜对各种风味的彩响悄况1
甘.赖?笨丙?丙.鳜.天冬?谷.谷?天冬酰胺.纊?异亮?甘.谷氨酰胺.酩?甘.挤 ?亮.苏.苯丙?天冬胺.賴?纗.异亮?铕? .半lit.蛋?賴.輳.(家?异亮.酤. 谷_天冬酰胺?I
C.ti/而的基因组的DNA文库中分离得到3-磷酸甘油醛脱羧酸酶(GAP)基 因,其DNA序列测定后发现有一 1005hp的ORF片段0从C. utUis中得到的 GAP基㈥克隆至6.5kh £co/U片段。起始密码子上游的Ikb片段(-976? -1,推断+丨为翻译起始位点)作为启动子,用引物在V端加上N?d位点, 在3'端加上Xbal和BamHI位点。终止密码子下游0.7kb片段(+ 1006? + 1728)作为终止子,用引物在V端加上BamHI位点,在V端加上Pst丨位点, 将两片段在pBluescript SK的No丨丨和Pst丨位点间连接,构建得质粒pGAPPTIO (图5 - 15)。含单链莫奈林的0RF的0. 3kb的Dral - Bgl D片段插至pGAPPTIO 的平头Xbal位点和BamHI位点之间构建得PGAPM3。含rDNA片段的表达质 粒如下构建:从pCLRE2 (图5-14)中分离得到的含部分rDNA的1.2kb Apal 片段插至pBluescript SK的Apal位点构建得质粒pCRAl。在pCRAl的Xhol切 割平头端连接上Sphl连接体构建得pCRA2,在pCRAl的Asp7丨8切割平头端 连接上Notl连接体构建得pCRA3。pCRA3的1.2kh rDNA切割为0.5kb和 0. 7kh Notl - Bgl n片段后连接到质粒pUCBgl的Bgl n位点,构建得质粒 pCRA10o其中质粒pUCBgl由pUC19经EcoRI和HindHI酶切,并在Klenow酶 切处理后在切点处连接Bgl D连接体构建得到。质粒pCRA2经Sphl和EcoRI 酶切后,与由PCLRE16分离得到的含CYH抗性基因的1. Ikl, Sphl - KcoRI片 段连接构述得pCLR216。质粒pCRAlO经Xhol和Ps丨I酶切后,与含CYH抗性 基因的丨.1比?311-5&丨1片段(-184?+974)连接,构建得到pCRALll。从 PGAPM3分离得到的含莫奈林表达盒的2. Okb Notl - PstI片段插至pCLR216的 Notl和PstI位点构逑的质粒PCLRM216 (图5 - 16),插至pCRALl 1的Not丨和 PstI位点间构建得到质粒pKMll (图5-16)。C. W/is的URA3基因经与 的ura3突变子减基互补克隆得到,用作整合目标。URA3的801bP ORF 的 区域(+4?+356)和 3'区域(+356 ~+685)分別为 SaH-Bgin 和Bgl丨丨-AsP718片段,这两个片段插至pUC19的Sail和AsP718构建得质粒 pURAl0在pURAl的Hindffl酶切端和Asp718酶切平头端加上Not丨连接体分 别构建得到pURA2和PURA3。从pURA2的5,端分离得Noll - Bgl H片段,从 PURA3的1端分离得BglD - Notl片段,两片段连接至质粒pUCBg丨的Bgin位 点构建pURAlO。含CYH抗性基因的1. lkb PstI - Sail片段插至pURAlO的Sail 和PstI位点间,构建得pURALl 1。含莫奈林表达盒得2. Okb的Notl - PstI片段 插至pURALll的1^11和?8|丨位点间构建质粒pUMll (图5-16)。
第三章庚精衍生钾
滴加7.40mL (0. O53mol)三乙胺,约lOmin加完,继续搅拌lh,得无色透明溶
通过比较发现,仙茅蛋白和其他6种甜蛋白和变味蛋白间的序列或结构没 有相似性,但它和雪花莲的植物凝血素(GNA)的41%完全一致,65%同源 (homology) 0 GNA是连接有甘露糖的植物凝血素。Hestei?等认为基于GNA和
甜蛋白最初均从植物直接提取,但这种生产方式有较多不足之处。利用基因 工程生产甜蛋白不受季节、产地等影响,是一种很宥前途的生产方法。目前这方 面的研究相当活跃,除嗦吗甜、莫奈林这方而的研究成果显著外,其他甜蛋白利 用基因工程生产也在进行中。如美国Nek丨ar Worldwide公司已将Brazzein表达至 玉米中,丨t转基因玉米中能提取lkgBmzzein。美国生物资源国际公司正研究通 过种植和转基因方法生产Miraculin。据报道,H本Asahi Denka Kogyo公司和生 化研究所已将Curculin在转基因植物和大肠杆菌中表达。
这些蔗糖衍生物的化学制备涉及许多步骤,通常为丨5 ~20多个反应,这不 可避免导?致产物得率比较低,因此以上提到的蔗糖衍生物的制备多数只存在理论 上的可能。但是通过进一步研究蔗糖衍生物的味觉品质,可以得出甜味分子结构 与甜度之间的关系。通过大鱼研究表明,蔗糖C-4、C-l\ C-4\ C-6'上任 何位置被卤素取代,所得蔗糖卤代衍生物甜度都比蔗糖强,而C-6上的取代则 可能导致甜味降低甚至产生苦味。
虽然嗦吗甜是一种蛋白质,但它对热相当稳定。其稳定性与PH、温度、其 他可溶性物质(如氧气、酸性多糖及合成色素等)的存在与否密切相关。总的 说来,pH较低时,嗦吗甜的稳定性增大,当pH小于5. 5时,即使在100X温度 下加热数小时其甜度也不减弱。因此它适用于各种典型的软饮料(PH2.8~ 3.5),产品可经巴氏杀菌甚至超高温杀菌。蔗糖与葡萄糖的存在能增大嗦吗甜 的稳定性。有些酸性多糖(如角叉胶)的存在会因相互影响而使之甜度变弱, 但明胶能增大其稳定性而不降低其甜度。当pH较髙时,嗦吗甜的热稳定性变 小,但在室温、pH为8 ~9的碱性环境中仍较稳定。嗦吗甜在PH2以下环境中 可感觉到的酸味大于甜味,这可通过中和脱盐(如通过透析作用)而恢复其甜 度。嗦吗甜在PH2. 7?6.0范围内热稳定性很好,而在PH2.8~3.0附近稳定性 最好;可用无机酸或有机酸(如盐酸、柠橡酸、苹果酸或南马酸)来调节pH。

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