古城区木糖醇
巨大芽孢杆菌(B.megalerium) NC1B 8508可以将葡萄糖发酵为G - 6 - a。 当巨大芽孢杆菌（B. megaterium) NCIB 8508在由0.4%葡萄糖和Duff & Wehley 盐介质组成的培养基中于30尤摇瓶培养时，即可专一地分泌出G-6-a,而不形 成多乙酰化葡萄糖酯。
阁5-3 带嗦吗甜基因的质粒图 注：在大扬杆菌中选择性标记为Wa.在酵母中为fcu2-rf;在醉母中2-micron、ori Y和PAT153中的 oW 分别给解母和大肠杆两提供了复制功能。
质粒pET-3a/SNase-SW转化至大肠杆菌BL21 (DE3) /pLysS菌株进行表 达。采用pLysS菌株可以消除引人前核酸酶的不利影响，更有利于核酸酶- Brazzein融合蛋白的表达。转换后在37T加人100|xg/mL阿司匹林、34jjig/mL氣 霉素的Luria培养基（LB)中培养一段时间后，加人IPTG后培养2~3h，大肠 杆菌中分子质萤23ku的融合蛋白产量达到最大，多数在内含体沉积，在16%的 Tricine凝胶中50%?70%的融合蛋白不溶。内含体蛋白经电泳凝胶提纯后，大 部分融合蛋白重新折黉(refolded),提纯纯度> 80%。经CNBi?处理后， 50%?70%融合蛋白发生解离，这说明融合蛋「丨不能完全解离。因Brazzein酸性 较强，p/约5.4，而核酸酶碱性较强，p/9.4，因此融合蛋白解离后用阳离子交 换色谱即能分离产物。纯化得到的重组Brazzein具有较高纯度及正确的分子质量 (6.4ku)0解离后得到的肽链与^-pGlul -Brazzein序列相同，甜度是植物提 取Brazzein的2倍，与从植物中分离得到的如-pGlul - Brazzein甜度相当。已 研究表明蛋白质只有在折垒正确时才具有甜味，未折垒(unfolded)或折奋错误
一、仙茅蛋白的化学结构
四筑乙恍
用400U/g甜菊苷的酶量，在55T, pH6.5下搅拌反应12h,淀粉貴对转化 结果的影响见图4-8。
(三）莫奈林在转基因植物中的表达
注：①根据总残留》计算;
0.1 -0. 4mol/L NaH2P04 (或 MES 或 Bis Tris propane)缓冲溶液中，在 pH5. 5 - 8.0、温度22~40弋的条件下反应2?48h。反应体系中的溶剂、pH、缓冲溶液 的浓度和反应温度都会影响酶的活性，但对酶的选择性的影响比较小。反应过程 中乙腈等有机溶剂的比重不能超过50%，如果超过，溶剂体系会使酶发生改性 而降低水解率。反应温度的升髙会加快反应速率，但会使反应的选择性有所降 低，反应最佳温度应控制在22-40T。
用最敏感的受试动物 小白氣；②最敏感的动物种（Sprague - Dewley
