望城区水苏糖
果浆中的仙茅蛋白不能用水抽提，因此经反复水洗可去除大萤水溶性物质, 然后可以用O.5rnol/L NaCI提取，这样就能明显提高仙茅蛋白的纯化倍数。 0.5mOI/LNaCl提取的提取液无色有甜味，然后经硫酸铵分级，再经CM-Sepha- _柱分离，NaCI线性洗脱后主要成分对应一个尖峰，该峰组分有甜味。加硫 酸铵至约饱和度的80%，得到的沉淀在lOrmnol/L磷酸缓冲溶液中溶解，溶液进 行Sepha(丨exG-100柱凝胶过滤纯化。这样从30g果浆（湿取）可以得到5mg纯 仙茅蛋白（表5-19)，得到仙茅蛋白纯度很高，不溶于去离子水，溶于盐溶液 中，等电点7.1。
关于糖精的安全性试验可归纳如下：
以嗦吗甜基因中322bp Ncol片段作为探针，与九awamori基因组中的单拷贝 gdhA基因杂交的694bPPvuII片段作对照，对转化体进行DNA印迹杂交分析以估 计各转化体中嗦吗甜表达盒的数最。分析表明，在各转化体的表达盒没有发生重 排，各拷贝数为5~14 (表5-9),表达盒的拷贝数与嗦吗甜产率有明显的相 关性。
甜味强度的定量测定甜味强度的测定目前只能通过尝味评定的方法来进行，因为尚无甜度的仪器 测定法。随着生物化学的发展，如果有可能从汚头中分离出具有活性甜味感觉的 受体蛋白来，那最终就有可能出现精确的仪器测定法。丨978年，Edwadson等人 报道了一种先进的免疫分析法，可以用来测定一系列甜味化合物与被选用抗血淸 的表观结合悄况。这个引人注目的进展有可能发展到出现一种评价甜味与化学结 构关系的客观方法。
试验表明，4-PAS在酸（如草酸、乙酸、对甲苯磺酸及对甲磺酸吡啶盐 等）催化下发生水解反应，预计产物为4-PAS与6-PAS的混合物（两者极性 相近，柱层析无法分离），但不用分离而用乙酸在惰性溶剂中将4-PAS进行异 构化，4位的乙酰基转移至6位，最终得到单一产物，可见这是制条6-PAS最 简便的方法。
表S-19 仙茅蛋白提纯工艺
4.对甜味分子空间结构要求的设想由于甜味感觉对底物的要求可以是小如CHC13分子，到大如多肽和大分子蛋 白质，因此可以认为，甜味化合物和甜味蛋白受体之间最初的相互作用，发生在 受体表面部分。对于那些与受体之间无疏水接触的甜味剂分子，由于这种表面吸 附之间的作用力相对较低，故其甜度也低，这也许就是糖和糖醉均不是很甜的原 因。对于那些与受体之间有一处或多处疏水键合的甜味剂分子，除了在AH、B 基闭上的两点接触外，更包含有空间上的疏水键合，这种更深层次的键合则很可 能发生在甜味蛋白受体中类似酶活性位点的“嵴”或“裂缝”中。
5-27),但是在两个亚基的C端尾部却都存在显著的结构差异。植物凝集素的C 端区域伸展至另一条亚基上，而在Neoculin中，NAS和NBS的C端区域均卷曲 成环，并由亚基间二硫键固定。C端区域的这种构象导致了亚基-亚基相互作用 程度的降低以及NAS和NBS中B11和B12间的新环（L11-12)的形成。Tan- credi等曾研究大分子甜味剂中是否存在可探测受体活性部位的“甜味指” (sweet fingers)。研究人员通过研究Neoculin的结构发现，Neoculin中并不存在可 能的“甜味指”，这和Tancredi等人的研究结果一模拟小分子质里甜味剂构象 而设想的“甜味指针”并不一致。
Claude等利用10%钯或铂碳催化剂在醇的水溶液中进行N -烷基化还原反 应。阿斯巴甜和3, 3-二甲基丁醛分别加人到甲醇的0. lmol/L的醋酸溶液中， 保持PH4.4?5.0，通人氮气一段时间，再加人碳钯催化剂并通人氢气进行还原 反应，常温、常压下反应2h。反应快结束时，通人氮气终止反应，反应结朿后 过滤去除催化剂，如有必要用lmol/L的氢氧化钠溶液把滤液调到PH5,滤液在 温度低于40七的条件K旋转蒸发去除中醉，在此过程中会有白色沉淀生成。甲 醉除去后，将剩K的混合物在室温下搅拌数小时使沉淀完全析出，经过滤、十燥 及正己烷冲洗，得到纯度大于98%的纽甜，反应产率为69%。
Osladin 是 1971 年由 Herout 等人从水龙母科（Polypodiaceae)植物 Polypodi- am vulgare L提取出的一种皂角苷，甜度为蔗糖的3000倍。与Osladin结构相似 的 Polypodosides A 和 B，则是从水龙骨科植物 Polypodium glycynhiza D. C. Eaton 的根状茎中分离出的。这种植物产于北美洲，俗称“甘草蕨” （Ucorice fem)。 Polypodosides A楚P. glycynhiza的主要甜味成分，在糖苷配基C - 3位上连接1 个新橙皮糖（2-0-a-S-P比喃鼠李糖基-芦-S-n比喃木糖）单元。Polypodosides A的糖苷配基与OsUdin糖苷配基的厶〃-衍生物相?致。
