嘉禾县麦芽糖醇
从植物中分离得到的Brazzein有几种结构，其中主要构型中的末端氨基酸 是焦谷氨酸（pGlu)[围5-24 (1)]0另一构型除末端没有该氨基酸外，其 余均相同，称为de8-pGlul -Brazzein [图5-24 (2)]t它的甜度是主要构型 的Brazzein的2依。按des - pGlul - Brazzein的氣基酸序列采用大肠杆菌优选 密码子合成的基因如图5-24 (3)所示。合成的Bra^ein基因若直接克隆至 质粒 pET-3a、pET-9a、pET - 1 la 和 pET - 16b 得到的 Brazzein 表达水平均 很低，只有pET-3a和pET-9a得到少量可溶的Brazzein。pET载体通常能使 外源可溶性蛋白如葡萄球菌核酸酶表达，葡萄球菌核酸酶与Brazzein的显著不 同是葡萄球菌核酸酶的氨基酸数目>100，且没有半胱氨酸或半胱氨酸含S很 低。若采用两种基因融合生产目的蛋白融合体的表达水平较髙，因此将 Brazzein合成基因插人葡萄球菌核酸酶表达系统。该策略经大肠杆菌生产鸟类 卵黏蛋白区证实很成功。
(四）苯酐二硫化物法
6 -氯-6-脱氧-D-呋喃果糖是甜的，但甜度低于蔗糖，而1，6-二氣衍 生物的甜度稍大些，相当于萠糖。这一现象很吸引人，因为其母体呋喃果糖没有 甜味。虽然在三氣蔗糖或1'，6^-二氣蔗糖（甜度为蔗糖的80倍）中的情形并 不如此，怛1，6-二氣呋喃果糖基单元被认为对三氣蔗糖的生甜团有作用。通 过对多羟基甜化合物（包括三氣蔗糖）的傅立叶红外光谱分析表明，不参与氢 键连接的游离羟基均有很陡峭的吸收吟。Kanter等人用X -衍射分析结晶状三氣 蔗糖的构象时，发现《-羟基和羟基之间存在者分子内键合（图3-51)， 而蔗糖是由于C-1 -0-C -21 司糖苷键的旋转而在2 -羟基和丨,-羟基间存在 分子内氢键（图3-38)。W此，三氣蔗糖的幣体构象不同于蔗糖。经两次同位 素复谱线局部标志本体（SIMPLE)的NMR图谱分析，在二甲基亚砜溶液中的4 种厂-氣-r-脱氧蔗糖衍生物（包括三氣蔗糖）都存在3#-0H—0-2分子
最初的甜蜜素是以薄片形状投放市场的，仅供糖尿病患者使用。后来出现了 甜蜜素与糖精的混合产品，不再仅限于糖尿病人食用，但主要还是用于糖尿病人 的食品。不久之后，粉末状和溶液状的甜蜜素产品相继问世，为扩大它的应用范 围提供了条件。后来。软饮料工业开始使用甜蜜素与糖精的混合物，使它的销售 情况大为改观，在美国的消耗童直线上升，成为一种消费摄很大的人工甜味剂。
第二节甜菊双糖苷甜菊苷带有较明显的苦涩味及薄荷醇味，甜味特性不太完美。甜菊双糖A 苷的甜度大约是蔗糖的450倍，甜味特性比甜菊苷更接近于蔗糖。含有甜菊双糖 A苷的甜叶菊粗提取物也因此比纯净的甜菊苷更甜、风味更好。虽然甜菊双糖苷 仍带有轻微的苦涩味，但比甜菊苷要弱多了。甜菊双糖苷~在食品和饮料中的 用量很少，因此它带有的微弱苦涩味对其影响不大。由于甜菊双糖苷的甜味特性 好、甜度大，世界上已有数个国家和地区，特别是日本、以色列和美国都在努力 实现商业化生产。
(二）嗦吗甜的甜味特性及其化学改性
已有几项专利描述了甜蜜素与阿斯巴甜、安赛蜜以及其他甜味剂的协同增效 作用。例如，Sea-描述阿斯巴甜、糖梢与甜蜜素混合使用改善饮料的口感和提 高消费者的可接受性。还有一项专利是关于甜蜜素、阿斯巴甜和糖精的混合物在 曰常食品中的应用。有人认为，甜蜜素与其他甜味剂共同作用，能起到增强甜 度、驱除不良感或味觉滞留现象的作用。
至于MNEI，也已被合成且克降于带有T71ac启动子的pET -22b +的载体 中，并于大肠杆菌BL21 (DE3)中得到表达。最近，单链莫奈林基闪MNE丨已 在大肠杆菌偏爱密码子的基础上被设计出来，从而优化了基因在大肠杆菌中的表 达。这些合成莫奈林基因被克隆于含T7启动子的PET-22 b载体。SDS-PAGE 分析结果表明，重组莫奈林的产虽髙达总可溶性蛋白的45%。
尽管对三氣蔗糖结晶体X -射线的结构分析表明，在2 - OH和3' - OH之间 会形成一个分子内氢键，其中2-OH是质子受体，3'-OH是质子供体。但在一 个稀释的含水溶液中，分子内部的氢键很可能分裂，断裂开的部分可分别与螺旋 形甜味蛋白质受体中末端氨基酸残基上髙度缺电子的NH/ (AHr,下标i■是 指甜味蛋白受体，下同）和富电子的CONH2 (Br)形成外部氢键。因此，3'- OH/2 -0具备成为三氣蔗糖AH/B对组成的客观条件。
阁4-7反应时间和加酶毋对甜菊苷 转化效率的影响
