湾里区罗汉果苷
Brazzein通常与其他种类的甜味剂复配来改善饮料的口感。这种方法在柠檬 酸饮料和磷酸盐饮料中均有很好的效果。在适当的比例下，Brazzdn可与大多数 高效甜味剂复配成很好的甜味剂。分别或同时与安赛蜜和阿斯巴甜复配时， Brazzein还能提髙产品的稳定性、风味和口感。Brazzein可明显地消除其他甜味 剂甜味不纯的影响。例如，甜菊苷和Brazzem复配后，其甜味质量要比单独使用 甜菊苷好。
转化菌株TB2bl -44中已含有B2作启动子的表达盒，再经质粒pG丨)71 (该 质粒含有gdhA启动子和潮霉素抗性基因作标记基因的表达盒）转化得到双转化 体（double transfonrnin丨），从中选择产率较高的双转化体TB2bl - 44 - GD4、 -GD5、-GD6、-GD7在MDFA优化培养基摇瓶培养后达到最高的表达水平
二、甜菊苷的物化性质和甜味特性
丨氨酸（甜度为蔗糖的35倍）转变成6-氣代衍生物，其甜度增加了 30 倍，为蔗糖的1000倍。这说明研究蔗糖的氣化衍生物也是可取的。然而，糖楮 (甜度为蔗糖的500?700倍）的氯化衍生物其甜度只有蔗糖的100 -350倍，氣 化处理并没有提髙该分子的甜度。
人体摄人某些蛋白质后会出现过敏性反应，特别是摄入了那些不能完全消化 吸收的蛋白质和多肽，为此，对嗦吗甜也进行了这方面的试验。经口摄取 lOOmg/d的嗦吗甜后，人体没出现任何与剂量有关的不良反应。用嗦吗甜溶液进 行穿刺试验（prick test)，也没发现任何过敏性反应。用猴子进行的皮下过敏性 试验，也没发现机体内有关嗦吗甜抗体的形成。
不同的有机溶剂，也会影响合成速率和平衡得韦。押论和实验都表明，乙酸 乙酯是最好的溶剂（表2 -7)。根据上述结论，我们分别用活塞流式反应器 (plug flow type, PFR)和连续搅拌釜式反应器（CSTR)进行试验，用固定在 Amberlite XAD-7的嗜热菌蛋白酶进行连续催化反应。首先将80mmol/L Z - Asp ^ 200mmol/L PheOMe溶解于饱和乙酸乙酯溶液，然后以外=1.5/h连续加人 PFR中，体系温度保持在40T。初始阶段反应得率>95%，反应进行80h后, 下降到30%左右（图2-26)。固定化酶发生了钝化，其主要原因是：在PFR 中，底物浓度在人口处最大，顺宥出口方向逐渐减小，人口处高浓度的Z-AsP 使嗜热菌蛋白酶的主要稳定因子Ca2<被螯合脱去，而且人口处固定化酶内部的 pH最低，使更容易被脱去。在底物中加入5mmol/LCa[ Z - Asp =80m?K)l/L, ct = 15。
三、色氨酸衍生物
本研究用二甲基甲酰胺（DMF)和氣化亚砜制备Vilsmeier试剂，此反应为 放热反应。将8.4mLDMF预冷至0T，加入8.5mL氣化亚砜，搅拌反应30min， 温度控制在50弋以下。反应结束后加人lOOmL DMF，将混合液冷却至Ot,在 20T：以下缓慢加入15g6-PAS (Vilsmeiei?试剂：6-PAS =4:1),在0弋下保持 15min0慢慢升温至70T,通人氮气来赶走部分HC1，此温度下维持30min后再 逐渐升温至100?12(rC，恒温反应3~5h,趁热以活性炭脱色，浓缩滤液，冷却 后有晶体析出。待结晶完全后过滤，用无水乙醉重结晶，得到白色针状晶体，为 4，丨\ 6'-三氣-4,丨\ 6、三脱氧-2, 3, 6，3\ V-五乙酸半乳蔗糖醋 (TOSPA)。
