平塘县爱德万甜
人们总是向往安全无毒的天然产品而希望最大限量地减少合成添加剂的食 用，就算糖精是安全的，然而它带有的明显苦涩味仍令不少人感到不足。加上最 近出现的几种安全性较高、风味又很好的新型甜味剂——阿斯巴甜、安赛蜜和嗦 吗甜等，无疑对糖精具有很大的威胁，糖精要继续发展似乎不大可能。而且，就 是现在，人们对糖精的安全性问题也没有取得统一的看法，对这个古老的人工甜 味剂，前景并非乐观。
要使表达系统的表达水平较髙，则必须选择一强启动子。以Escherkhia coli lacZ为报告基因，发现C. ulULs的GAP启动子比C. utilis的PGK启动子的 效率高几倍。W此用的部分GAP基因（TDH3 )作为探针从
芦-D-呋果聚糠 苷-办-D-咲嚙塔格期<2200 x> (205 x>图3 - 57 C-4'取代基构象对三氣蔗糖衍生物甜度的影响
②甜菊苷被肠内微生物分解成甜菊醇和葡萄糖；
②国际研究发展联合会的研究指出：能明显引起身体变化的糖精最小摄入 量为3%，这相当于一人每天饮用750罐软饮料中所包含的糖精总數量。
1983年，国际研究发展联合会完成了一个大量的生物分析试验。在这个试 验中，受试第二代雄鼠总数高达2500只，分别给2125只第二代雄鼠喂以含 1.00% ~7. 50%糖精钠的饲料。所采用的为非平衡试验方法，大量的动物喂给低 浓度的糖精，如有700只动物喂给1.00%的糖精钠，有125只动物喂给7. 50% 的糖精钠。所用的几个主要试验均是出于最坏方向考虑而安排的，例如：①选
Kondo等人曾尝试构建一 SCM质粒并在C— idilis中生产SCM。他们把 SCM基因插入由产脘假丝酵母(C. utUis)克隆来的GAP基因的启动子和终止子 片段之间。通过这种方式，他们获得了高产虽的SCM，表达水平高于总可溶性 蛋白的50%。他们还尝试克降带S. cerevisiae GAPDH启动子的SCM基因用来生 产SCM。然而，所得的产最水平很低，仅为总可溶性蛋白的5%左右。美国一专 利公开了利用P. pastoris生产SCM的方法。首先将合成的SCM基因克隆于含有 S. cerevisiae a -因子分泌信号和GAPDH启动子的PGAPZa -载体，然后将构建的 质粒转化成P.P^tori5GS115，最后通过菌株对Zcocin的阻抗性，对转化株进行 筛选。观察发现所分泌的.1：组英奈林为一条12kji的带。SDS - PAGE分析表明， 通过该方法可获得约10g/L的SCM。这些SCM经纯化后可引起甜味。
表S -15 奇异果素的氨基酸组成顺序
Kohmura和Ariyoshi等通过Fnioc策略用固相合成法合成了马槟榔II，合成 步骤是：
在世界各国的有关文献上，以采用阈值浓度（cT>来比较味强度者较多，所 谓阈值，就是仅能察觉到味逬时的最低浓度，例如甜度一般采取以蔴糖在阈值时 的甜度作1.00为标准。但按Fechnei?规律(c)a,即甜味强度尺与甜味剂浓 度c的n次方成正比。对糖分子来说，其n = l.?;对人工甜味剂糖精和甜蜜素 等，其〃小于丨。如用最稀的觉察浓度（阈值cT)相比，前者为蔗糖的1/700， 较后者小70倍，即以蔗糖的阈值浓度为丨.00时，糖楮的甜度是700，甜蜜素的 甜度是70。但用最高浓度的/??值相比，前者较蔗糖强不到一倍，而后者反不及 蔗糖甜。这是因为搪楮和甜蜜素与甜受体的结合常数分别比蔗糖要大 两个和一个数谊级。当浓度增大时，蔗糖的甜度增加很快，而糖精的甜度增加却 很慢。因此，阈值浓度的甜味倍数只限于作学术探讨用，不能作为实用价值标 准。甜味倍数也受溶剂、pH和温度等的影响。例如，在51时果糖比蔗糖甜, 在60t时蔗糖比果糖甜。因此，试验条件还有必要标准化。
