彭泽县高麦芽糖
鸡蛋淸溶菌酶娃唯一来源于非植物的甜蛋白，其生物学功能早已被详细研 究，可把它归于甜蛋A却不过是最近的事情。1988年，Maehashi和Udaka声称 鸡蛋清溶菌酶具冇明显的甜味，而其他来源的溶菌酶，如火鸡和中华鱉中的溶菌 酶也具有甜味，但甜味不同，或重些或轻些。相反，人体内的溶菌酶却是没有甜 味的。不同溶菌酶的氨基酸序列都与鸡蛋清溶菌酶的相似，但这些溶菌酶的序列 与其他甜味蛋白之间都没有明fi的同源性。鸡蛋淸溶菌酶的甜味阈值约为 10jjumoI/L,比嗦吗甜和莫奈林的阈值高200倍。溶菌酶的碱性有可能在其甜味 产生作用中扮演重要角色，其中的两个赖氨酸残基——Ly813和Lys96,以及三 个精氨酸残基一Argl4、Arg21和Arg73对溶菌酶的甜味产生起重要作用。
甜菊苷的毒理试验于20世纪20年代起源于日本Hokkaido大学，自20世纪 70年代起，日本、美同、韩国和巴西等国家都进行过这方面的研究。
本研究用二甲基甲酰胺（DMF)和氣化亚砜制备Vilsmeier试剂，此反应为 放热反应。将8.4mLDMF预冷至0T，加入8.5mL氣化亚砜，搅拌反应30min， 温度控制在50弋以下。反应结束后加人lOOmL DMF，将混合液冷却至Ot,在 20T：以下缓慢加入15g6-PAS (Vilsmeiei?试剂：6-PAS =4:1),在0弋下保持 15min0慢慢升温至70T,通人氮气来赶走部分HC1，此温度下维持30min后再 逐渐升温至100?12(rC，恒温反应3~5h,趁热以活性炭脱色，浓缩滤液，冷却 后有晶体析出。待结晶完全后过滤，用无水乙醉重结晶，得到白色针状晶体，为 4，丨\ 6'-三氣-4,丨\ 6、三脱氧-2, 3, 6，3\ V-五乙酸半乳蔗糖醋 (TOSPA)。
在不同条件下蔗糖水解反应的实验值及拟合结果如图4-23所示。可以看出，各 条件下的拟合结果和实验值吻合。蔗糖起始浓度为40mol/m3 [图4-23 (2)所示] 时，G和F浓度的实验值与计算值有微小差别，这可能是因为部分F异构化为G。
(-)从甜菊叶子中提取甜菊双糖A苷在过去的10多年中，人们作了很大的努力企图从甜菊叶子中提取双糖A苷 进行商业化生产。已知提取T.艺中用来分离甜物质的是髙度极性溶剂——水，这 是因为甜菊苷仅微溶于水而双糖苷A在水中的溶解度很大。通过浓缩去掉水， 然后再用甲醇提取即可优化先分离出双糖苷A产品，但其中还含有部分甜菊苷。 去除甲醇后通过二氧化硅胶柱采用丙醉-水-乙基乙酸盐溶液作流动相进行色谱 分离，再在戊醇水溶液中通过重结晶方法即可得到纯净的甜菊双糖苷A。通过这 种方法，可从叶子中提取出0.25%的结晶双糖苷A。而不经色谱分离则可从干
注：①p-NP是对硝基笨-a-D-半乳糖苷，此处酶沽力以p-NP为底物进行昶量；
(三）三氣蔗糖与食品配料的配伍性
已有人进行甜叶菊S. rebauduma植物的改性育种研究。日本报道了对该植物 进行细胞组织改性后培育出的植株其双糖A苷含最是原来的2. 56倍。在这种植 株中，双糖A苷的含与甜菊苷相等。总之，甜菊双糖A苷以其更优、更好于 甜菊苷的特性而引起人们浓厚的兴趣，不少人正致力于商业化生产技术的研究。
如图3 -22所示，Vilsmeier试剂是一种较好的氯代试剂，其优点表现在制备 容易和选择性较好，它可安全有效地氣化蔗糖分子4、r和&位，理论得率可达 80%以上。Vilsmeier试剂枭由无机酸氣化物与化学式为R2NCOX的义W - 二烷 基胺（如二甲基甲酰胺、二乙基乙酰胺）反应制得，其中X代表氢原子或甲基， R代表烷基。通常使用的无机酸氣化物有无氣化磷、光气和氣化亚砜等。
甜菊苷最终的分离效果，通常受水溶液中添加溶剂进行结晶这一过程所 影响。
