七里河区阿拉伯糖
(三）邻甲基苯胺法
当带嗦吗甜基因的质粒转移人酵母，在选择性培养基上培养一段时间后， 在相应的培养基中发现了甜味嗦吗甜A、B,且分子质粗均与成熟嗦吗甜的分 子质量相同。嗦吗甜I虽用同样方式生产，但没有出现在培养基中，该结果与 它不能在体外折叠相符。由此可以看出单个氨基酸变化对蛋白质结构影响 很大。
比如糖精、阿斯巴甜之类高效甜味剂的开始作用时间（onset times〉与蔗糖 不同，停止刺激后的甜味持久性也与之不同，其甜味质量也有所区别。这样，就 给人们提出这样一个问题：不同的甜味剂是否具有不同的甜受体？有人怀疑受体 的均匀性，认为没有专一性受体，而只有一般化的受体，即可能存在多种甜 受体有些精神物理学资料也支持存在几种不同甜受体这种观点。但味觉改性研 究，诸如用森林匙葜藤酸（gynmemic acid)去除掉所有类型的甜味后并不改变 其苦味特性的研究，表明公共受体存在的可能性更大些。Grosby等人和Price等 人认为同一受体上有不同的结合部位，并列举了数个理由来支持：①用蔗糖溶液（0.32rnol/L)洗舌后发现蔗糖甜度降低80%，用糖精溶液 (0.01mol/L)洗舌后发现其甜味减少55%，这表明同种甜味剂进入受体上同一 部位有饱和效应②蔗糖与甘氨酸混合后甜度比单一的强3 ~5倍，这说明不同类型的甜味削 进入不同部位有协同增效作用。③果糖能抑制甘氨酸的甜味，蔗糖或糖精能减少多种甜味剂的甜度，这又 表明多种甜味剂进入甜受体同一部位发生了竞争性抑制。④若有多种受体，則不同的甜味剂进入不同的受体，将没有竞争，其甜味 应有加和性而无协同增效性。但迄今尚未有这方面的验证，而电生理实验证明同 一受体可有不同的结合部位。⑤甘茶甜素和二氢查尔氓两类甜味剂都具有以下结构，但其空间专一性要 求各不相同。
多点结合甜味理论1991年，Tinti & Nofre提出了著名的多点结合甜味理论（the Multipoint Attachment Theor) ) 0该理论认为，人体甜味蛋白受体最少包含八个基本的识別 部位，这些识别部位与甜味分子相应的结合部位发生相互作用，从而产生甜味 刺激。
奇异果素是一种糖蛋白。早期的分析认为其蛋白质部分由373个氨基酸组 成，相对分子质遗3000?42000，等电点在PH9附近。表5-14列出奇异果素的 氨基酸组成。有关多糖部分的分析结果差异大，有一种结果只检测出阿拉伯糖和 木糖两种水解单糖，含量占奇异果素总量的6.7%。另外的结果是水解共得到5 种单糖：葡萄糖、核糖、阿拉伯糖、半乳糖和鼠李糖，总含萤山 15% -21.0% ； 还有一种分析结果测出4种单糖：岩藻糖、木糖、拄雜糖和半乳糖，总含量 6.3%。如此显著的差异，很可能与样品的纯化程度有直接的关系。
多点结合甜味理论多点结合甜味理论认为，人体甜味蛋白受体最少包含八个基本的识别部位， 分别为B、AH、XH、G:、G2、G3、04和0，这些识别部位能够与甜味分子相成 的结合部位（B、AH、XH、G,、G2、G,、04和0)发生相互作用，甜味分子的 八个结合部位的空间排列见图1 -17。该理论不再使用疏水作用的概念，而以空 间作用部位代替疏水部位。甜味分子与受体蛋 白相互作用的结合部位的数世，以及两者相互 结合作用的有效程度，决定了该甜味分子的甜 度强弱。其中相互作用的有效程度是影响甜度 的主要因素，结合的有效程度与甜味分子大 小、空间填充性、参与结合的活性基团的化学 图丨-丨7甜味分子八个结合 性质及其空间取向有很大关系。 部位的空间排列
表3-19 三氣蔗糖衍生物计算机横拟构象的AH、B、X距离 单位:
pH (2) PhcOMe/mmol/L围2-25 在饱和乙酸乙酯中，用固定在Amberfi丨eXAD-7的嗜热菌蛋穴鵑 催化合成Z - A?p - PheOMe的结果(1)一，平衡得率（Z - Aap = 80mmol/L, PheOMe =200mmol/L, a = IS)；—?—，初衫反应速车（Z - A?p = PheOMe =80ma>ol/L，a = 15):——，阋定化嗜热*蛋白醻的穗定性.用闭定化酶在40t乙酸乙曲饱和溶液中浸浼一；I)启残留相对法 力表示C
阿斯巴甜（Aspartame，180倍）和阿力甜（Alitame，2000倍）是二肽甜味 剂的典型代表。根据多点结合甜味理论，阿斯巴甜属于B,、B2、AH,、XH,, XH2、G,、E,、G2、Ga 型甜味剂，阿力甜则属于 B,、B2、AH,、XH,、xh2、 G,、G2、G3、G4型甜味剂，见图丨-23。超强阿斯巴甜是阿斯巴甜与氰基Su- osan的反应产物，甜味是蔗糖甜味的8000倍，通过范德华力作用，其分子上 G,、G2、G4三个结合点与受体蛋白结合，多点结合模型见图1 -23。如果以硫 原子替代超强阿斯巴甜分子上脲氣原子，生成硫代超强阿斯巴甜，由于硫原子的 吸电子能力强，使得脲基NH (AH,和AH2)酸性增强，与蛋白受体的亲和力增 强，从而使甜度增加，其甜度是蔗糖甜度的4_倍。
商业化甜菊苷提取精制方法，大多属于专利范围，为专利所有者掌握。从发 表的专利文献上肴，生产工艺包括用水或乙醇提取、脱色，之后用离子交换树脂 法、电解法或添加沉淀剂法进行提纯，后经结晶干燥而成。图4-4所示为一典 型的提取工艺流程。虽然可用乙醉类有机溶剂进行提取，但生产厂家更喜欢使用 水提取法。
