从化区果糖
筛选具有水解TCR活力的微生物，通常要经过如下3个步骤。①将微生物置于以棉籽糖为惟一碳源的培养基中进行富集培养。②用超声波破碎微生物细胞，并以对硝基苯-a-D-半乳糖苷为底物对微 生物进行活力测试。那些确定具有对硝基苯-a-D -半乳糖苷活性的微生物， 再进一步检测其水解棉籽糖为半乳糖和蔗糖的能力③对具有水解棉籽糖沽力的微生物再用TCR进行筛选，以确定其水解TCR 的a-半乳糖苷酶活力。 < 关于嗦吗甜在各种含水香味溶剂.(如乙醇、异丙醇、甘油和丙二醇等）中 的溶解性情况，前面已讨论过。试验表明，这些溶剂对嗦吗甜的甜味特性及风味 增效特性影响很大。例如将嗦吗甜的乙醇溶液（含乙醇60%)置于3CTC下贮藏 1周后，取出相当于2mg嗦吗甜的溶液冲稀释至lOOmL,就感觉不到甜味。而这 一浓度的嗦吗甜溶液的甜度通常都是很高的，相当于4% 的蔗糖液的甜度。 虽然贮藏后的溶液并没发生浑浊或沉淀现象，但需添加为通常数萤10倍的嗦吗 甜才会感觉到甜味，这说明大约有90%的甜味已经丧失。然而，！h以后重新品 尝这种溶液时发现甜味竟然完全恢复了。进一步的研究发现，时间对这种现象的 发生关系很大（图5-2)。 注：先将胶质基料加热至71.71,混合5min,加人山梨糖醉液混合5min,之后依次加人丨/3山梨糖 醉粉、丨/3山梨糖醉粉、甘油和香柄及病氽的丨/3山梨糖醉粉、阿斯巴甜。每次加人部分配料后黹混合 5min0最后将均匀的混合料冷却至37.8-43.3T,挤压成片状、球状或条状后即坷包装。 果浆中的仙茅蛋白不能用水抽提，因此经反复水洗可去除大萤水溶性物质, 然后可以用O.5rnol/L NaCI提取，这样就能明显提高仙茅蛋白的纯化倍数。 0.5mOI/LNaCl提取的提取液无色有甜味，然后经硫酸铵分级，再经CM-Sepha- _柱分离，NaCI线性洗脱后主要成分对应一个尖峰，该峰组分有甜味。加硫 酸铵至约饱和度的80%，得到的沉淀在lOrmnol/L磷酸缓冲溶液中溶解，溶液进 行Sepha(丨exG-100柱凝胶过滤纯化。这样从30g果浆（湿取）可以得到5mg纯 仙茅蛋白（表5-19)，得到仙茅蛋白纯度很高，不溶于去离子水，溶于盐溶液 中，等电点7.1。 如前所述，纽甜的平均和90%的每日消耗量是用纽甜来取代所有产品中的 阿斯巴甜来预测的，在美国这些预测值分别是0.04和0. lmg/(kg*d)，这是个 非常保守的假定。然而，在实际上用纽甜来取代所有的阿斯巴甜是不太可能的， 而许多的其他甜味剂的使用会更进一步降低纽甜的用量。因此，预测的纽甜消耗 量远低于美国FDA所制定的可接受的每日摄人量，纽甜的实际消耗量也将会少 于市场前期的估计。 除了在食品中的应用以外，安赛蜜还用在口腔卫生制品及药品的增甜上。牙 音和口腔类产品通常由于添加表面活性剂而带来苦味，因此需用些香料和甜味剂 来掩盖。由于安赛蜜甜味作用快，特别适合用在这些口腔卫生制品上，它可和通 常用在牙音和口腔淸洁剂上的香料相媲美。对于化妆品，如果对香料浓度要求不 严格的话，要使安赛蜜快速作用，则要求香料组分浓度适当低些3正如前述，安 赛蜜很适合与山梨糖醇混合使用，而山梨糖醇则常用在牙裔上。若用甘油作湿润 剂和增白剂，也不存在溶解困难的问题。虽然安赛蜜在纯乙醇中溶解度很小，但 安赛蜜作为要溶于含酒精的口腔淸洁剂的配料中也未遇上闲难。在乙醇-水混合 液中，安赛蜜的溶解度通常要比口腔淸洁剂浓溶液中的大。 0.3g/L0以重组酵母GS115/PPIC9M/PPIC3.5kV为出发菌株，通过摇瓶水平发酵 条件优化，高甜度莫奈林的分泌表达量进一步由0.3g/L提髙到了 0.5g/L。在 30L发酵罐上采取分批补料的方式实现了重组酵母GS115/pP丨C9M/PPIC3. 5kV的 高密度发酵，高甜度萸奈林分泌表达量达2g/L。而且表达的髙甜度萸奈林分泌 到胞外，无需破碎细胞提取。诙方法提供了一条产量高、分离纯化简便、可低成 本大规模生产高甜度英奈林的新途径，为实现髙甜度莫奈林的产业化和vgb基因 在毕赤酵母髙密度发酵中的广泛应用萸定了基础。
