西安市山梨糖醇
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曾尝试在大肠杆菌中表达重组奇异果素。在表达载体中插人以化学法合成的 奇异果素基因，所得的载体即转化成大肠杆菌菌株HB101。尽管通过SDS - PAGE和Western印迹分析可检测到重组奇异果素的存在，但是，所得的通组奇 异果素并不具味道修饰作用。在酵母和转基因烟草中的尝试结果也一样，尽管都 成功地表达出了重组奇异果素，但是产物也不具备甜味诱导活性。
Jin等人通过考察更多的突变体，对上述数据进行了优化。ASp29Ala、 Asp29Lys、Asp29Asn和Glu4〗Lys这四种突变体都显示出了比天然Brazzein更为 显著的甜味特性。Ala2itw、A叩2Asn和Glnl7Ala这三种突变体则和天然的 Bmzzein —样甜。在另外8种突变体的甜味尽管明显下降，但仍然还是有味道 的，而有10种突变体，它们几乎和水一样无味，见图5-23。最近，Jiri等人又 通过把天然的Brazzein序列中一个特定Asp替换成Lys或Asu，所得产品的甜味 特性和甜度都有所增强。
Hernamhi丨cin属于红没药烷倍半萜烯化合物，化学结构如图4-42所示。它是 用石油魅溶剂从墨西带马鞭草科（Verbenaceae)草本植物Lipph dulcis Trev.高轮 空中的荽藤部分提取出的天然甜味剂，甜度是蔗糖的丨000倍。西班牙物理学家 Francisco Herndmiez早在1570 ~ 1576年间撰写出版的专著《新西班牙的自然史》 一书中，就指出这种Lc/u/cis具有甜味，墨西哥的印第安人就是根据这部专著认识 该植物的。今天，人们将提取自该植物的甜味化合物命名为Hemamhi丨dn，就是为 了纪念这位物理学家的贡献。
不同的有机溶剂，也会影响合成速率和平衡得韦。押论和实验都表明，乙酸 乙酯是最好的溶剂（表2 -7)。根据上述结论，我们分别用活塞流式反应器 (plug flow type, PFR)和连续搅拌釜式反应器（CSTR)进行试验，用固定在 Amberlite XAD-7的嗜热菌蛋白酶进行连续催化反应。首先将80mmol/L Z - Asp ^ 200mmol/L PheOMe溶解于饱和乙酸乙酯溶液，然后以外=1.5/h连续加人 PFR中，体系温度保持在40T。初始阶段反应得率>95%，反应进行80h后, 下降到30%左右（图2-26)。固定化酶发生了钝化，其主要原因是：在PFR 中，底物浓度在人口处最大，顺宥出口方向逐渐减小，人口处高浓度的Z-AsP 使嗜热菌蛋白酶的主要稳定因子Ca2<被螯合脱去，而且人口处固定化酶内部的 pH最低，使更容易被脱去。在底物中加入5mmol/LCa[ Z - Asp =80m?K)l/L, ct = 15。
图丨-33所示为MNEI和Brazzein的内部（与受体接触的部分）和外部（暴 露与溶剂的部分）的比较。MNE丨和Brazzein的等电点分别是9.0和6. 7。如图 1 -33所示，Brazzdn的负静电势大部分集中在其外部表面
表S-10 莫奈林的氨基酸组成 单位：个
三、三氣蔗糖的生产技术
甜，产率为80%。
阁2-丨2在不同pH下温度对阿斯巴甜 图2-13在25弋时pH与阿斯巴甜
