和林格尔县麦芽糖

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采用电穿孔法,将质粒转至产朊假丝酵母(Candida ulUis)中。该方法较简 单并能实现Candida utUis的高效转化。对转化条件进行优化以达到最优转化率。 据研究,酵母在最优电脉冲转化率下存活率为50% -70% ,因此通过调整场强、 内阻和电容大小,使Candida utUis的存活率达10%?70%。在加了4(Vg/mL CYH的YPD平板培养基上培养C— ulUis转化体(4(Vg/mL CYH是野生塑 Candida ulilis能在YPD培养基生长的最高浓度),进行CYH抗性转化体选择。 YPD培养基组成为:2%葡萄糖、l%BaCto酵母抽提物、2%Bacto蛋白胨。由于 电脉冲导致酵母细胞膜的破裂,使细胞对渗透压更敏感,因此电脉冲处理后细胞 立即在YPD培养基上培养不形成菌落D电脉冲处理后细胞立即分散在选择性培 养基,也不能得到CYH抗性菌落,需在30弋含lmol/L山梨糖醉的YPD培养基 上预培养一段时间后,再转移至含CYH的培养基才能得到转化子。
然而,纽甜的实际消耗量会比这些估计的数字要小。当今市场上除阿斯巴甜 外,还有甜蜜素、安塞蜜、糖精钠等其他甜味剂。而许多产品混合使用了两种或 更多的甜味剂,而不是单一的添加阿斯巴甜,因此,纽甜的实际消耗最将会少于 在阿斯巴甜消耗世的基础上所作的预测。
(二)预测的摄入ft纽甜的安全性必须建立在特定的使用条件下,需考虑添加纽甜的食物种类、 用量、添加纽甜的目的和食用该产品的B标人群等许多因素。可接受的每日摄人 量一般是基于动物毒理试验的结果(通常是用啮齿动物作长期试验)。添加纽甜 可接受的每日摄人量是用其无毒副作用水平除以丨00 (即提供100倍的安全系 数),同时需要考虑不同动物种系和人类个体间变异等因素。
20世纪70年代日本进行了大量的研究以确定甜菊苷是否具有致突变性和致 癌性。日本厚生省对11个食用甜菊苷地区的癌症调查中,没发现任何值得注意 的事例。1985年,日本山田等人报道了他们对雄、雌小鼠的38种器官的组织病 理分析结果,没发现任何有与甜菊苷摄人量有关的毐性效果。
在典型结构上进行AH、B系统研究的最好办法是有选择地一个接-?个去除 掉糖环上的氧原子,然后品尝所得的产物。当用a,a-海藻糖及其同系物甲 基- a - D -吡喃葡萄糖苷进行这方面的试验时,所得到的味觉特性结果很一致。 只有去除掉第3个氧原子时才发现甜味有明显的下降,它们的许多单脱氣衍生物
三、利用呋喃果糖酶改性甜菊双糖苷
2-36所示,纽甜可以很方便地通过还原烷基化反应,由阿斯巴甜和 3, 3-二甲基丁醛制得。它是在钯(Pd/C)或铂(Pt/C)氢化催化剂的存在下, 用氢气处理阿斯巴甜和3, 3-二甲基丁醛的甲醇溶液来进行的。可以制得它的 无水化合物,但通常得到的都是单水合物,含4.5%结合水,经验分子式 ? H20,相对分子质谊3%.480图2-35 纽甜的化学结构^cho^apm-^ntm W2-36 通过3, 3-二甲基丁醛还原Af-烷基化制得纽甜
尽管人们已提出部分假说来解释奇异果素的作用机理,但具体情况仍有很多 不明之处,Kurihara等人提出的假说认为:在酸环境中,奇异果素的糖蛋白分子 形状发生变化,使得多糖部分的阿拉伯糖一木糖能有效地接近并刺激甜味受体。 用蛋白酶进行改性处理会导致奇异果素的活性丧失,由此显示出蛋白质框架结构 对保持活性的重要作用。但用高碘酸钠处理使其碳水化合物部分发生氧化降解反 应,同样也会使其丧失活性,虽然氧化反应对分子中的蛋白质部分也会起作用。 现有人正在研究糖苷酶或糖羟基团的化学改性处理对奇异果素的活性的影响。

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