东至县爱德万甜
{三）甜菊苷的分子改性
将莫奈林分子A、B肽链拆分开后其甜味丧失，单独的A或B肽链即使浓度 很高也没有甜味。将被拆分的A、B链重新混合，其甜味会缓慢恢复至原分子的 12%左右。往分子中引入二硫键，甜味即丧失，经二硫赤藓糖醇还原后，甜味随 之恢复。通过化学法将B肽链中惟一的一SH (半胱氨酸）衍生化，不论衍生后 基团的大小与带电情况如何，分子甜味均丧失。尚不淸楚的是，这个惟一的半胱 氨酸娃在蛋白质分子与甜受体相结合时起重要作用呢，还是由于一SH基团的衍 生化而改变了分子的基本构象呢？莫奈林所具有的抗原激活特性，也会随 着一SH基团的屏蔽或A、B链的分开而钝化。
表5-9 各转化体中嗦吗甜表达盒拷贝数（以切咖单拷贝gdhA基因为对照}
(四）甘草甜素的抗炎症效果甘草甜素具有抗炎症特性，但有关机理尚未完全弄淸楚。让白鼠口服甘草亭 酸，60min后再用1%的角叉菜胶注射A鼠的爪子（注射剂量0. lmL),发现甘 草亭酸能减轻由角叉菜胶引起的炎症。甘草亭酸还具有阻止由葡聚糖诱发的白细 胞向胸膜位转移的作用，但它不会抑制白鼠腹膜白细胞中前列腺素的释放和生 成，也不会改变猪肠中回前列腺素诱导产生的收缩作用。
在第三种机理中，刺激物分子不可逆地进入接近离子载体的“有序排列队” (orderly queue),这条排列队的物理长度决定了持久性。三种机理中前部分离子 载体阶段与第二种机理相同。
(七）甜菊苷的代谢研究
一、甜叶悬钩子苷
当食用含嗦吗甜的U香糖时，口腔接触嗦吗甜的时间较长，这是否会刺激口 腔黏膜发炎或过敏呢？在一个有50人参加的试验中，每天摄取含15g嗦吗甜的 口香糖，每天至少接触15miri，持续28d后没发现任何过敏反应。
质粒pET-3a/SNase-SW转化至大肠杆菌BL21 (DE3) /pLysS菌株进行表 达。采用pLysS菌株可以消除引人前核酸酶的不利影响，更有利于核酸酶- Brazzein融合蛋白的表达。转换后在37T加人100|xg/mL阿司匹林、34jjig/mL氣 霉素的Luria培养基（LB)中培养一段时间后，加人IPTG后培养2~3h，大肠 杆菌中分子质萤23ku的融合蛋白产量达到最大，多数在内含体沉积，在16%的 Tricine凝胶中50%?70%的融合蛋白不溶。内含体蛋白经电泳凝胶提纯后，大 部分融合蛋白重新折黉(refolded),提纯纯度> 80%。经CNBi?处理后， 50%?70%融合蛋白发生解离，这说明融合蛋「丨不能完全解离。因Brazzein酸性 较强，p/约5.4，而核酸酶碱性较强，p/9.4，因此融合蛋白解离后用阳离子交 换色谱即能分离产物。纯化得到的重组Brazzein具有较高纯度及正确的分子质量 (6.4ku)0解离后得到的肽链与^-pGlul -Brazzein序列相同，甜度是植物提 取Brazzein的2倍，与从植物中分离得到的如-pGlul - Brazzein甜度相当。已 研究表明蛋白质只有在折垒正确时才具有甜味，未折垒(unfolded)或折奋错误
三氣蔗糖。
