汉阳区果葡糖浆

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四、奇异果素的生产技术
图5-2 乙醉溶液浓度对嗦吗甜甜味刺激反应的影响
用固定化酶催化合成肽的反应条件优化要考虑3个因素:间定化酶的稳定 性、反应时间和平衡得率。图2-25 (1)所示为a = 15时,固定在Amberlite XAD-7的嗜热菌蛋白酶稳定性、平衡得率、相对起始反应速率。裁体内部最优 pH为5~6。当PH <5时,起始反应速率低且酶不稳定;pH >6时,平衡得率急 剧下降。在大多数情况下,多孔载体内的pH只由底物和产物的缓冲作用决定, 用酸或碱中和的方法很难调节。这是阂定化酶以非水溶性有机溶剂为介质催化合]’可增加酶的稳定 性,但得率仍会逐渐下降。在CSTR整个反应器中,底物和产物浓度各处均 相等。
在双酶-化学联合法中,最值得关注的是优化G-6-a的发酵条件,以及 改善糖和糖酯的分离技术,这将有助于提高该法的效率。因此,脔要对G-6-a 形成过程中的生物化学和生理学机制,进行详细的研究以简化该操作。而快速分 析、良好的反应控制以及适时地终止反应,也是本方法所必需的。如能以蔗糖为 原料经微生物发酵作用直接生成S-6-a,这方法当然非常吸引人,在这方面值 得花大力气加以研究。
也可以通过烟草表达莫奈林。首先合成了由噬菡体PI Cre重组酶介导的特异 ?组位点丨OXP的序列,构建了两个loxP同向重复的棺物表达栽体pGLX121. 1。 PCR定点突变了 CaMV 35S启动子元件中kozak序列,使kozak中的翻译起始密码 子ATG位于Ncol位点上。把spm基因克隆到表达载体pG〖MA的Ncol和PstI之 间,给甜蛋白8pm基因加上35S启动子和polyA及NOS终止子元件,然后克隆到 PGLX121. 1的EcoRI位点上,用农杆菌LBA4404转化烟草,获得卡那痗素抗性转 基因植株,经过PCR及southern分析,证明甜蛋白spm基因已整合到烟荩基因组 内。用转基因烟草的总RNA通过RT-PCR反转录扩增spm基因,证明了在35S启 动子及其他调控元件的控制下,spm基因在转基W烟草中转录表达出mRNA。提取 转基因烟草总蛋白,经SDS-PAGE分析,初步证明了 8pm基因在转基因烟草中表 达出目的甜蛋白。
第六章人工合成甜味剂
研究人员猜测,Neoculin特有的在B11和B12之间的C端环,可能在甜味产 生和味道修饰作用中起一定的作用。在连接/S-链的其他环中,Neoculin特有的 氨基酸序列主要位于四个环——L2-3、L4-5、1^-7和19-10中。尤其在 NBS中,位于12-3、L4-5和L6-7三个环的六个碱性残基于分子表面组成一 个大碱性区域,这一特征使得Neoculin表面的静电势分布明显有别于植物凝集素 中的。研究人员猜测,这个结构群有可能参与了 Neoculin的甜味产生和味道修饰 作用。
成肽时的最主要特征。
图5-26 Neoculin的带状图 (1) NeooJin异型二聚体的总体结构(每一个亚基中的/3 -链由B丨至B12择明,
最后制备6-甲基-3, 4-二氢-1, 2,3-嗯__4-阐-2,2 - 二氧化

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