福建纽甜

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莫奈林基因已在一些微生物和植物中进行了表达,表5 - 13列出了其中一些 研究结果。
TB2bl -44的产物经纯化后得到三种嗦吗甜组分A、B和C (图5-9), 它们与天然嗦吗甜组成略有区别。这是由于在质粒构建时,在表达盒中采用了 两个串联重复的Lys-Arg序列,使KEX容易识别,从而对B2 -嗦吗甜融合蛋 白进行切割释放嗦吗甜。因此在KRKR序列不同位点切割后产生这三种组分, A组分为嗦吗甜II末端加了一个Arg,占丨8%~20%; B组分为嗦吗甜II末端 加了 LyS-Arg,占75% - 78% ; C组分为嗦吗甜II末端加了 Arg - Lys - Arg, 占3% ~5%。由于TG丨)Th-4上淸液中嗦吗甜的结果相同,这三种形式的纯嗦 吗甜都有甜味。
在嗦吗甜I、A、B基因的y端,加上3-磷酸甘油活化酶(PGK)启动子, 在3'端加上PGK终止子作为转录终点和多聚腺苻酸信号。将嗦吗甜基因试剂盒, 克隆至及co/i-酵母间的运送载体,质粒pJDB209。由于嗦吗甜基因在£:.?>/〖和 酵母中都能复制,因此既能在中对基闽进行操纵,又能在酵母中对基闪进 行功能测试。但质粒PJDB209含有一个leu2 - d标记,使办-异丙基苹果酸酯脱 氢酶在酵母中的表达水平较低^将带嗦吗甜基因的质粒转移至突变株中, 这样由于约每200个酵母细胞完成一个突变,因此嗦吗甜基因试剂盒利用 率也提髙了约200倍,基因表达水平也相应提高。
一、阿力甜的化学结构与甜味特性
除天然物外,Hemaruhilcin也可通过合成法制得。以两种酮类化合物为原 料,通过3 -羟基丁醛缩合作用可直接制得外消旋的Hernandulcin。研究表 明,一旦改变了 Hernandulcin的功能因,甜味随之丧失。Hernandulcin分子 中C-厂羟基团和C-丨羰基闭,分別是Shallenberger甜味模型中的AH和B 生甜闭。除此之外,C-4与C-5,之间的双键是该化合物维持甜味的第三个 关键基团。
第三节奇异果素
1978年马里兰国家牙科研究所就嗦吗甜对大鼠的致龋齿特性做了专门评价,结 论是嗦吗甜不会引起牙齿龋变,但也不会抑制龋齿现象发生,即不具抗龌齿活性。
已知TCK只有在亲水的溶剂中才能高度溶解,但在保证酶解反应能得到 必要的水的前提下,a-半乳糖苷酶却被证明在与水不互溶的有机溶剂中, 最稳定并具有最高的活力。这个矛盾,可以通过使用被含水缓冲液预饱和的 有机溶液时得以解决。研究发现,高水混溶的溶剂如二氣六环、丙酮、甲醇 和四氢呋喃等,即使使用高达30%的含水缓冲液进行预饱和,也不支持 a-半乳糖苷酶的水解反应。但在含水缓冲液预饱和的正丁醉、甲基异丁基 酮和乙酸乙酯三种溶液中,TCR的溶解度均达到50%以上。这些溶剂同时 也支持a-半乳糖苷酶的活力,只是三者对三氣蔗糖的溶解性存在很大的差 別,如表3-9所示。
在一个长达2年的动物喂养试验中,分别用0%、0.1%、0.3%和1%浓度 的纯度为95. 2%的甜菊苷喂养小白鼠,雄鼠喂养22个月,雌鼠喂养24个月, 然后取雄、雌鼠各10只进行临床和病理学分析。结果表明,0.3%剂量组雄、雌 鼠出现轻微的生长延迟现象,丨%剂量组出现短暂的生长停滞现象,所有试验组 和控制组在总体外观、悄感与行为方面均无多大差异。喂养6个月后尿液、血 液、血生化特性及器官重里发生了一系列的变化,但喂养丨2个月及最终的喂养 结果并没发现这些差别。肿瘤病变与否及其严重性均与甜菊苷的摄人水平没有直 接的关系。
1969年,由于甜蜜素可能的致癌作用,导致美同国家科学院研究委员会否 决了甜蜜素的公认安全物质的地位。这一决定的依据是一家位于纽约的Maspeth 食品医药研究室的某些实验结果。该研究室的实验原料不是单一的甜蜜素,而是 甜蜜素与糖精的混合物。但是,后来其他人重复这个实验时,并没得出与之相同 的结果。

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