三沙市安赛蜜
然而，将之作为甜味与甜味剂理论一种极有效素材的研究工作仍在进行之 中，因为自然界中具有变味作用的天然化合物中只有奇异果素这一种效果最明 显，研究文献也比较多。奇异果素糖蛋白分子中所隐含的神秘变味机理，仍呼唤
后一种假设需要些条件，它至少要求甜味与苦味受体同时存在于一个细胞 内。对同时具有甜味和苦味的甲基a - D -吡喃甘錤糖的研究证实了这个观点。 如果分子确在受体上两端极化，那么用蔗糖浓溶液预饱和甜受体就能阻止另一种 方式的结合。如果分子同时分别分配给甜味、苦味受体细胞的话，则对它们各自 的结合方式不产生什么影响。当用蔗糖预饱和舌头时，具有苦味的甲基a-D- 甘露糖苻的苦味会减小些，而同样悄况对奎宁（纯苦分子）的苦味却不产生什 么影响。因此，同时具有苦味和甜味的甲基a吡喃付孫糖苷能同时结合甜 受体与苦受体，用蔗糖预饱和一种结合方式（如与甜受体结合）就会影响另一 种方式的结合（如与苦味受体结合>。从另一个方向来进行这方面的实验，如用 奎宁来预饱和会得到同样的结果（见图1-35)。因此，至少有些甜受体与苦受 体之间的距离极近，在0.3~0.4nra范围内。H前，一个分子具有不同的结合方 式这种观点是许多假说的主题。受体本身还是假说的实体，各种有关它们的本质 的理论是通过对有味分子底物的化学研究建立起来的。
利用从Af vinacea ATCC 20034中分离出的a -半乳糖苷酶，在上述三种有机 溶剂中将TCR水解为6-氣半乳糖和三氣蔗糖的反应过程，如图3-37所示。虽 然在甲基异丁基酮中，a-半乳糖苷酶水解TCR的反应速率达到了水相反应的 90% ,怛在每种溶剂中起始反应速率和最终产物浓度都比在水溶液中低。低反应 速率是由于在溶剂系统中，a-半乳糖苷酶有更高的A：?,而非一个更低的A：#。 因此在有机溶剂中，要获得和水相反应相似的反应速率，只能通过高底物浓度来 实现，但酶的活力因溶剂影响而快速降低。在所测试的溶剂中，酶的半衰期都不 超过3d。当TCR的水解度超过60%时，反应速率明显降低，因此要获得超过 80%的水解度就显得非常困难，必须使用很高的酶浓度并大大延长保温时间 (数天）。目前为止，还没有一种《-半乳糖苷酶能达到90%以上的水解度。
对阿斯巴甜及阿斯巴甜盐酸化物的晶体结构作了分析，沿着肽主链的键几乎 都是反式的。根据Goodman等人上述的观点，阿斯巴甜旁链优先存在的构象是 F.D,,而阿斯巴甜盐酸盐优先存在的构象是FBDI。在天冬氨酰羧基 和胺基呈反式存在，因此不是活性构象。相反，Gorbhz认为FuDi是活性构象， 因为它最符合Kier的甜味三角形模式。然而，Kier的三角形模式是根据硝基苯 胺而不是二肽确立的。Heijden等人认为二肽的甜味三角形要比硝基苯胺的大， 因此FnDB构象最符合。另一密切相关的化合物是阿斯巴甜的LiBr复合物，结晶 状态以F,D■为优先构象，所以在固体状态下，阿斯巴甜及其HC1盐、UBr盐的 优先存在构象均不一样。
第五节其他高效糖苷
二、蔗糖的酯化、醚化和脱氧化衍生物
C. masaikai Levi果实的种子经0. 5mol/LNaCl抽提、硫酸铵分级、CM - Seph- arose柱分离，并通过比较各组分的SDS - PAGE图和HPI.C的保留时间，可以得 到各组分。这样得到的样品纯度很髙，分离得到的马槟榔D在SDS -PAGE中， 只在分子质里141^1处有一条带。
以核糖体蛋白质L41基因为标记，将用32P标记的含C. makosa的RIM - C基 因的Xbal -Sau3AI片段与Candida utUis ATCC9950的基因组DNA进行DNA杂交 分析，结果表明存在一个与KIM - C基因同源的基因。对Candida ut'dis ATCC9950的DNA用Sau3AI进行部分切割后的片段（5~10kb)转人经BamHI 酶切的质粒PBR322构建基因组DNA文库，用RIM - C基W探针对约30 000个 克隆子进行筛选，筛选得到5个正（positive)克隆子，对其中3个质粒构建了 限制性酶切谱图（图5-11)。该同源基W在质粒DNA上的大致位置通过对质粒 的限制性酶切片段进行DNA杂交分析得到。将能与探针杂交的4kb EcoRI片段 双向亚克隆至质粒pBluescript II SK进行DNA序列分析，现已测定广含L41基因 的2086hP的BamHI - SacI片段的DNA序列（图5 - 12),其排序策略如图5-11 所示。
