云霄县果葡糖浆
б, 4\ \\ 6"-四氣棉籽糖，再经a-半乳糖苷酶水解去除Gal-6-C1即得
表2 -24 符合下列通式化合物的结构与甜度的相互关系
表3-7 选择性氮化反应正交试验
奇异果素存在于果浆，不溶于水。曾有研究用含有高碱性化合物如鲑精蛋白 (Salmine)或精胺的碳酸盐缓冲液（PH10.5)进行提取，这样容易导致变味活 力的下降，而且溶解了多种很难去除的深色物质，无法得到高纯度的样品。奇异 果素能用0. 5mol/L酸性NaCI溶液提取，这样得到的奇异果素在酸性pH中很稳 定，并且提取液无色。Sarroch Theerasilp和Yoshie Kurihara开发了奇异果素的提 纯工艺：冻干的果浆中的活性成分经0.5mol/L NaCI酸性溶液溶解抽提后用 (NH4)2S04分级沉淀，沉淀再经CM - Sepharose离子交换色谱和CcmA - Sepha- rose 4B柱提纯。用该方法得到的奇异果素纯度非常髙，得率为20g冻干果浆提 取得到36mg产品（表5-18)。
要在酵母中表达嗦吗甜，首先要合成相应的基因。为使基因能在酵母中高效 表达，采用酵母优选密码子合成嗦吗甜I基因，为便于操纵DNA序列，在嗦吗 甜基因设计时在序列中包含多个限制性酶切点。嗦吗甜I基因长度为630bP,它 的DNA序列的5'端和1端分别为Bel I位点和Xho I位点。嗦吗甜I合成基因经 直接定点突变或DNA片段替换合成嗦吗甜A、B基因。将嗦吗甜I基因113位 的天冬酰胺的密码子替换为天冬氨酸的密码子即得嗦吗甜A基因序列，随后将 嗦吗甜A基因46位的天冬酰胺的密码子替换为赖氨酸的密码子即得到嗦吗甜B 基因。
阁2 - 87 二肽化合物的AH - B - X呈味三维模型 1、2_甜味3、4、6—无味5_苦味
该表达系统以产朊假丝酵母(CandUla utihs)为莫奈林基因的宿主细胞，采 用的GAP启动子，对的核糖体蛋甶L41基W进行体外突变得到 的放线菌酮Uycloheximide, CYH)抗性基因作为标记基因，质粒构建后再线性 化，以多拷W整合至宿主染色体进行表达。
一、奇异果素的化学结构
另有人把蕺菌血红蛋白基因(vgb)基因在毕赤酵母中的功能应用于高甜度 莫奈林所组酵母，解决毕赤酵母高密度发酵中存在的供氧不足的问题，进一步提 高髙甜度莫奈林的产萤。他们将获得的由高甜度莫奈林和vgb两个基因同时整合 的重组酵母GSU5/pPIC9M/pPlC3.5kV,以甲醇诱导，高甜度英奈林基因和vgb 基W分别以分泌和胞内的形式得到表达，且表达产物均有生物活性。VHb在胞 内的成功表达，使重组毕赤酵母高甜度莫奈林的分泌表达量提高了 20%，达
