夏河县高麦芽糖
第一节三氯蔗糖
另外进行了一个长达52周的试验，分别使用100%阿斯巴甜、阿斯巴甜与 糖精混合物、糖精、蔗糖的软饮料。仅用阿斯巴甜的可乐饮料5T藏于5弋、20X. 和30T的环境中，混合使用糖精-阿斯巴甜的可乐饮料IT藏于20尤环境中，单 独使用糖楮或蔗糖的贮于室温中。对4种含有阿斯巴甜的可乐进行分析，结果表 明在各种贮藏温度下，pH为2. 8?3.0的饮料中的阿斯巴甜首先出现分解现象。 还发现在5T条件下贮藏的使用了阿斯巴甜的饮料，与单独使用蔗糖的饮料在 “适口”与“甜度”方面并没有差别。含阿斯巴甜的可乐在5T、201下贮藏26 周后，其可接受程度很好。
天然Brazzein的氨基酸序列缺少端蛋氨酸（甲硫氨酸）[图5-24 (2)]， 因此合成基因[图5-24 (3)]的第一个密码子前引人起始密码子Met。野生型葡 萄球菌核酸酶中含有4个蛋氨酸，经CNBr解离产生的肽链会影响Brazzein的分离 纯化，因此用快速定点突变将核酸酶基因（SNase)的4个Met的密码子用Ala的 密码子替换。SNase的4个蛋氨酸转化为己氨酸（正亮氨酸）对核酸酶活性没有影 响，SNase中蛋氨酸突变为丙氨酸会降低核酸酶的稳定性。经修饰后融合蛋白中只 有一个的蛋氨酸间隔SNase和SW K [图5-25 (2)],所得的融合蛋白表达水平 高并且核酸酶具有活性。在如-pGlul - Brazzein合成基因的5'和3'端分别加上 Ndel和BamHI位点，这样就可以克隆至任一 pET质粒。通过对天然核酸酶-卵类 黏蛋白融合基因表达质粒进行改造构建新的质粒。将Brazzein合成基因（SW基 因）插人pET-3a表达系统SNase基因C-端的Ndel和BamHI位点之间，得到质 粒PET-3a/SNase-SW [图5-25 (1)]0融合蛋A转录和翻译信号由T7表达载 体PET-3a产生，蛋白质在lac启动子的控制下生产。
已有100多个试验结果证实了三氣蔗糖的食用安全性，没发现三氣蔗糖及其 副产物的任何不利影响。即使以很髙的剂最（丨6g/kg)喂养啮齿动物终生，也 可确认其安全、无毒性。而这个16g/kg的剂萤，相当于人体每天摄取1801碳酸 饮料所包含的三氣蔗糖数摄。
然而，鉴于两代白鼠试验发现了明显的膀胱癌变，似乎没有一个国家认为可 以无限里地使用，丹麦、荷兰等国家仍严格限制它的使用，世界食品添加剂联合 专家委员会也将原先同意的糖精AW值0?5mg/kg减少到0. 0-2. 5mg/kg,并取 消了有条件的0~15mg/kg。
表3 -18 三氮蔗糖及其衍生物与受体蛋白的作用部位
B,、B2是阴离子，如C02' SO/、CN；,或者氢键受体原子，如卤素原 子、氧原子；AH,、AH2、XH,、XH2是氢键供体基团，如NH\ NH、OH； E,、E2、E3、￡4是氢键受体原子，如氮原子、氧原子、卤素原子；G,、G2、 G3、G4通过分子间空间作用力与受体识别部位结合，通常为非极性或弱极性 小基团、原子，如CH3、CH2、CH、F,极性大原子如Cl、Br,也能与识别 部位有效结合；D通常是4-苯腈基团，通过氢键受体基团CN与识別部位 结合o
四、阿力甜的安全毒理学分析
