独山县结晶果糖
(二）非均匀反应体系
4-PAS在系统中的浓度也会影响得率，浓度过低，反应速率变慢，反应时间延 长；浓度过高，加速其他一些副反应，影响到产物的质量。图3-19所示为含 15% ~35%4-PAS甲基异丁基酮溶液的反应情况，其中乙酸浓度为8%,反碎 时间3h，显示浓度25%为佳（得率75% )。
③使大B链片段Glul - Gly41和另外一个B链片段Pro42-Trp72片段反应， 生成全长B链；
由于甜味剂和甜味蛋白之间在大小上存在着巨大的差异，因此，研究人员认 为，甜味蛋白所作用的受体有别于低分子质量甜味剂的。尽管对活性位点的间接 研究早已表明了甜味蛋白受体存在的可能性，可事实上，这些受体一直到近几年 才得到确定和分析。
根据R,和R2基团的酯基和烷基能够互 相罝换这一事实，可认为在这两个位罝上与 甜受体之间的相互作用，与其说是静电吸引 作用还不如说是大小和形状的相互配合。当 &和R2都是疏水性基团且R,小于&时，所 生成的天冬酰胺（图2-73 in)具有 甜味。
通过将SCM基因克隆于带GADPH后动子和终止子的表达载体pGAP，然后 将其转化成S. DC04和DBY746,可生产出重组SCM及其突变体。利用
利用从Af vinacea ATCC 20034中分离出的a -半乳糖苷酶，在上述三种有机 溶剂中将TCR水解为6-氣半乳糖和三氣蔗糖的反应过程，如图3-37所示。虽 然在甲基异丁基酮中，a-半乳糖苷酶水解TCR的反应速率达到了水相反应的 90% ,怛在每种溶剂中起始反应速率和最终产物浓度都比在水溶液中低。低反应 速率是由于在溶剂系统中，a-半乳糖苷酶有更高的A：?,而非一个更低的A：#。 因此在有机溶剂中，要获得和水相反应相似的反应速率，只能通过高底物浓度来 实现，但酶的活力因溶剂影响而快速降低。在所测试的溶剂中，酶的半衰期都不 超过3d。当TCR的水解度超过60%时，反应速率明显降低，因此要获得超过 80%的水解度就显得非常困难，必须使用很高的酶浓度并大大延长保温时间 (数天）。目前为止，还没有一种《-半乳糖苷酶能达到90%以上的水解度。
Brazzein由54个氨基酸组成的小分子质蛍单链蛋白，富含赖氨酸。它有一 种异构体，由53个氨基酸组成（仅仅缺乏第一个氨基酸，被称为des-pGkil - Brazzein) , des - pGlul - Brazzein甜度更高，是Brazzein的2倍，是目前为止所 发现甜蛋白中分子质量最小、水溶性最好的蛋白。
(三）酶反应的最优条件
后来，研究人员成功地证明了异型二聚体T1R2-T1R3为真实的甜味受体， 这为今后建立更为真实可靠的同源模型敞开了大门。
