湖北果糖

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生产。
198丨年,FDA在广泛审查了科学家们的大规模安全资料之后,FDA委员 Arthur Hull Hayer对阿斯巴甜的食品添加剂地位予以认可。Hayer指出,从曰本来 的一项关于脑肿瘤的科学研究资料,坚定了他决定批准的信心。PBO丨主席后来 写信给Hayer表明,日本的研究數据坚定了专家们给予阿斯巴甜一个“无条件的 批准”的立场。
显然,具有显著a-半乳糖苷酶活力的酶制剂都是从霉菌菌丝体中获得的。 在5个具有最强的水解TCR活力的筠菌中,有4个是从W.wVwcefl中获得的,有 1个是从C. muscae中获得的。其中Af. vitmcea ATCC 20034在所有被测试的微生 物中,对TCR具有最高的水解能力。从该微生物中提取的a-半乳糖苷酶(EC 3.2.1.22)不含转化酶的活力,目前已在甜菜糖精炼中被用来水解棉籽糖。它还 可以被固定化,此时对TCR则有更强的水解能力。
四、纽甜的生产技术纽甜可以由阿斯巴甜(APM)与3, 3 _ 二甲基丁醛(简写为DMBA)经催 化加氢还原烷基化反应而制得;也可以将阿斯巴甜的前体物与3, 3-二甲 基丁醛经过类似的反应后氨解得到。由于阿斯巴甜供应充足,价格稳定,故一般 采用第一种方法合成。
上述揭示的有关二肽化合物结构-甜度的关系理论为设计、探索新的二肽甜 味剂提供定性指导。根据这些理论,人们制备了数百种相对甜度在0~5_倍 之间的二肽同型物。目前有两种定量方法用来分析二肽甜味剂对结构方面的要 求,第一种就是经典的结构-甜度分析法(QSAR分析法),它能够分析二肽化 合物物理性质与甜度的关系;第二种是构象分析法,它通过数宇计算并借助 NMP来分析确定二肽甜味剂对最佳构象的要求。
早期,人们观察到丨,2 -亚乙基甘醇和甘油之类的无环多元醉具有甜味。 这些简单的分子中包含与糖一致的结构特点,人们因此就很自然地推想到糖的甜 度与分子内的羟基总数目有关。然而人们很快就认识到,含有相同羟基数目的葡 萄糖和半乳糖所具备的甜度相差甚大,而含有5个羟基的木糖醇却比含有6个羟 基的山梨糖醉要甜得多。很显然,这种根据羟基数目推测糖分子甜度的假说是错 误的。
甜蛋白最初均从植物直接提取,但这种生产方式有较多不足之处。利用基因 工程生产甜蛋白不受季节、产地等影响,是一种很宥前途的生产方法。目前这方 面的研究相当活跃,除嗦吗甜、莫奈林这方而的研究成果显著外,其他甜蛋白利 用基因工程生产也在进行中。如美国Nek丨ar Worldwide公司已将Brazzein表达至 玉米中,丨t转基因玉米中能提取lkgBmzzein。美国生物资源国际公司正研究通 过种植和转基因方法生产Miraculin。据报道,H本Asahi Denka Kogyo公司和生 化研究所已将Curculin在转基因植物和大肠杆菌中表达。
质粒pET-3a/SNase-SW转化至大肠杆菌BL21 (DE3) /pLysS菌株进行表 达。采用pLysS菌株可以消除引人前核酸酶的不利影响,更有利于核酸酶- Brazzein融合蛋白的表达。转换后在37T加人100|xg/mL阿司匹林、34jjig/mL氣 霉素的Luria培养基(LB)中培养一段时间后,加人IPTG后培养2~3h,大肠 杆菌中分子质萤23ku的融合蛋白产量达到最大,多数在内含体沉积,在16%的 Tricine凝胶中50%?70%的融合蛋白不溶。内含体蛋白经电泳凝胶提纯后,大 部分融合蛋白重新折黉(refolded),提纯纯度> 80%。经CNBi?处理后, 50%?70%融合蛋白发生解离,这说明融合蛋「丨不能完全解离。因Brazzein酸性 较强,p/约5.4,而核酸酶碱性较强,p/9.4,因此融合蛋白解离后用阳离子交 换色谱即能分离产物。纯化得到的重组Brazzein具有较高纯度及正确的分子质量 (6.4ku)0解离后得到的肽链与^-pGlul -Brazzein序列相同,甜度是植物提 取Brazzein的2倍,与从植物中分离得到的如-pGlul - Brazzein甜度相当。已 研究表明蛋白质只有在折垒正确时才具有甜味,未折垒(unfolded)或折奋错误
(三} 4, 1、6'-三氣-6-乙酰基蔗糖酯(TGS-6-a)的分离
安赛蜜在水溶液中的稳定性取决于pH和温度,在食品和饮料中的最佳pH 范闱3~7。在正常情况下安赛密溶液的浓度差超过5%时,就能尝出甜味的差 异。如发觉甜味有差别时,就可预计到5%的浓度差已开始产生了。pH为3的 产品在室温储存几年后,其中的安赛密才有5%的损失,这已大大地超过规定的 储存期,随着pH的升髙,货架期的稳定性也进一步改进。在PH7.5的缓冲液 中,室温中储存10年后,安赛蜜含萤仍为99%,这就证明存放10年的安赛蜜 含谊在统计上没有显著的损失。

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