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(二）提高反应平衡得率的途径山式（2-5)知反应平衡得率会受底物浓度5。影响。S。增大，平衡得率增 大。在 L/ [H20] =0.5 (mol/L)-1, S0 = lmol/L A,平衡得率提髙至 11.8%，与5。=0.丨》1101/1.时的平衡得率4.55%相比增加不明显。由于通常在羧 基或氨基末端有保护基团的氨基酸溶解度很低，即底物氨基酸浓度不可能增加很 多，因此通过该途径很难大幅度提高平衡得率。这里介绍几种使平衡向肽生成方 向移动的方法。
三、三氣蔗糖的生产技术
在反应混合物中加人一定虽：的水，不仅能降低低熔点混合物的熔点，同时 还能够使酶溶解在其中。图2 -65反映了混合物中含水萤对反应产率的影响， 反应产率随含水萤的增加而增加。在含水最较低时，由于不能很好形成低熔点 混合物而影响了反应的进行。当含水萤超过12%后，反应产率的上升幅度趋 于平缓含水■(—)/%m 2 -65混合物含水*对产率的影响 注：其中苄氣羰基-L-天冬氨酸二乙期和D-丙氨酰胺分别加入0.5mmo丨，^-狹凝乳蛋卩丨酶浓 度为丨5% 37*C下反应8h。
控制下表达得到苯丙氨酸和天冬氨酸的聚合体。该聚合体可以用不同蛋白酶， 如可溶性或固定化胰凝乳蛋白酶、水溶性或固定化枯草杆菌蛋A酶Carlsberg、 可溶性蛋A酶K和可溶性蛋内酶嗜热菌蛋白酶水解得到多肽，但这些酶都不 能专一水解得到Asp-Phe。可溶性枯草杆菌蛋甶酶Carlsberg或蛋白酶K的催 化专?性不强，得到的水解产物为ASp-Phe、Phe-Asp和其他由这些二肽聚 合的低聚物；用固定化枯草杆菌蛋白酶催化得到的结果最好，水解产物中绝大 部分为Asp - Phe。
美国Baldwin-Montrose化学公司曾采用此法。此法原料便宜易得，反应条 件温和，但反应操作复杂。日本日东化学公司曾改以环己胺和三氧化硫的气相反 应合成甜蜜素。我国徐光保等采用FJ3N为原料，CH2C,2为溶剂，结晶母液套 用，九次循环试验表明，收率为95.2%。
表2-49 带有网性??下面"酯基团的二肽化合物及其甜度
图5 - 5 变性嗦吗甜体外折叠至天然构塑的操作流程
提取甘草甜素时，先将甘草切细后加5倍质量的冷水浸泡2d后过滤。往滤 渣中加3倍质量的水冷浸12h，再次过滤。合并两次滤液，经蒸发浓缩并冷却 后，加乙醇在低温下放置2d后过滤，滤液蒸发浓缩后得黑褐色黏稠状抽提液。 抽提液中的甘草甜素含量为15%，干燥失重为35%以下。甘草抽提液再次浓缩 干燥后，制得粗结晶，然后在稀乙醇溶液中重结晶制得甘草甜素终产品。
三氣蔗糖在酸性水溶液中（如在软饮料中）的性质特别稳定，这是决定它 的应用范围的一个十分重要的性质。
因莫奈林厲于蛋白质分子，㈥此对热、pH敏感。水溶液加热至55~65X：就 会丧失甜味，室温下pH小于2或pH大于9时也会丧失甜味。相对来说，它对 酸（例如PH2.4)还比较稳定，但对碱很敏感。用胰蛋内酶、糜蛋白酶或菠萝 蛋白酶处理后，甜味随之丧失^但用羧肽酶进行有限的蛋A质水解，仍会保持部 分甜味。未经变性处理的天然莫奈林分子，因其三级结构较为紧密，在一定程度 上可抵抗蛋H酶的水解。用8m?l/L的脲或十二烷基硫酸钠之类蛋白变性剂处理， 会引起甜味的不可逆丧失。但因用6mol/L胍盐酸化物处理所导致的甜味丧失现 象是可逆的，去除溶剂后其甜味有可能得以完全恢复。
