衡阳市糖精钠
大多数转化体培养72h时嗦吗甜产率达到最高，72h后产率明显下降（图 5-8)。但双转化体TB2bl-44-GD5的产率在72h后仍继续增加，这是由于它 的gdhA启动子与生长期同步表达，而酯酶B2启动子在生长期结束后表达，因 此当晚表达的启动子（如次级代谢的启动子）也能被Aauwnori转录机制识别 时，将一早一晚表达的启动子结合也许就吋以延长基因的表达时间。TGDTh-4 以硫酸铵为氮源培养48h时嗦吗甜分泌量达到最髙，这是因为它采用的 A. awamori的gdhA启动子通常较早表达。
2-93所示的L-型构象简化图2-86?图2-89分别对应于图2-92中的（1) ~ (4)。图2-93 (1)和（2)中的甲氧基苯基和芳香环相互接近，而图2-93
人们对莫奈林的兴趣仍在继续，但这主要是出于学术或理论上的重要价值, 因为莫奈林是研究甜味理论及甜蛋臼结构与甜味相互关系理论的一种极好的原 料。至于莫奈林的商业化生产及在食品中的实际应用，可能性并不大。主要是由 于该植物的栽种萤不多，栽培困难，甜蛋白本身的物化性质不够稳定，尚缺乏系 统的安全毒理数据等诸多原因。
第五章高效甜蛋白
表2 -50所列的一系列L -天冬氨酰-D -丙氨酸酰胺化合物，要比L -冬 氨酰-D-丙氨酸酯化合物稳定得多。无环酰胺和环己基酰胺化合物[81] ~[83]的甜度仅是蔗糖的100倍左右。经过引人刚性分支“下面”基团的化合物[84]~ [91]的甜度得以明M提高。环己基环的C-2和C-6位上简单的甲基 取代，可使化合物的甜度增加6倍，通过对R基团的优选，最后选定2, 2, 4， 4-四甲基-加过《^-酰胺[88]作为新型二肽甜味剂加以开发。这种化合物具有 较好溶解性和比阿斯巴甜更稳定的特性，已被命名为阿力甜（参见本章第三节）。 相应的D -丝氨酸敗胺和0 -甲基-D -丝氨酸酰胺化合物的甜度均要低一些。但 令人奇怪的是，这一系列中的葑基酰胺[91]只有中等的甜度，而前述的L-天冬 UWi-L-甲基葑基丙二酸二酯在酯类系列化合物中具有最大的甜度。
图2-33给出用阿斯巴甜增甜的饮料中天冬氨酸的含虽与日常食品中天冬氣 酸含量的对比。从中可以看出，香蕉中天冬氨酸含摄为丨29mg，而含阿斯巴甜饮 料只含有72mg，100g熟鸡中天冬氨酸的含量甚至为2764mg。图2-34所示为一 个9岁儿童每天从日常膳食或阿斯巴甜中获取的天冬氨酸的典型数虽。
②峰单位以mg三氯蔗糖/ ? h)表示。
要在酵母中表达嗦吗甜，首先要合成相应的基因。为使基因能在酵母中高效 表达，采用酵母优选密码子合成嗦吗甜I基因，为便于操纵DNA序列，在嗦吗 甜基因设计时在序列中包含多个限制性酶切点。嗦吗甜I基因长度为630bP,它 的DNA序列的5'端和1端分别为Bel I位点和Xho I位点。嗦吗甜I合成基因经 直接定点突变或DNA片段替换合成嗦吗甜A、B基因。将嗦吗甜I基因113位 的天冬酰胺的密码子替换为天冬氨酸的密码子即得嗦吗甜A基因序列，随后将 嗦吗甜A基因46位的天冬酰胺的密码子替换为赖氨酸的密码子即得到嗦吗甜B 基因。
