宜君县异麦芽酮糖
该表达系统以产朊假丝酵母(CandUla utihs)为莫奈林基因的宿主细胞,采 用的GAP启动子,对的核糖体蛋甶L41基W进行体外突变得到 的放线菌酮Uycloheximide, CYH)抗性基因作为标记基因,质粒构建后再线性 化,以多拷W整合至宿主染色体进行表达。
五、利用固定化酶法合成阿斯巴甜
(-)高甜度二肽同型物Searle公司最早的文献发表一年内,所发现的全部二肽甜味剂,其甜度均小 于阿斯巴甜甜度的两倍。最先发现的髙效二肽甜味剂,是L-天冬氨酰-D,L- 氨基丙二酸二酯。表2-49所示为反映“下面”酯基团重要结构特征的例子。 经适度取代的刚性基团(Rigidgroup)可得到最大的甜度,例如[70]环己基在 C-2位上的甲基化[71]能使化合物甜度大为增强,但在C-3或C-4位上的 取代[72]和[73],并没有这种效果,这显然是由于受体在立体空间中不能很 好地接受这些位置上的取代基。刚性二环葑基酯中与酯氧原子的/? _原子经充分 取代所得化合物[74],其甜度很大。系统比较四种可能的葑醉衍生物[74] ~ [77],可知它们的甜度范围高达1000 ~5_倍。
这些蔗糖衍生物的化学制备涉及许多步骤,通常为丨5 ~20多个反应,这不 可避免导?致产物得率比较低,因此以上提到的蔗糖衍生物的制备多数只存在理论 上的可能。但是通过进一步研究蔗糖衍生物的味觉品质,可以得出甜味分子结构 与甜度之间的关系。通过大鱼研究表明,蔗糖C-4、C-l\ C-4\ C-6'上任 何位置被卤素取代,所得蔗糖卤代衍生物甜度都比蔗糖强,而C-6上的取代则 可能导致甜味降低甚至产生苦味。
(4)口香糖和糖果。
糖精和甜蜜素是2种最古老的人工合成甜味剂,甜味特性较差,带有明显的 苦后味,且食用安全性问题一直没有明确答案,但因价格低廉而被广泛使用。
有人曾用酶法和化学法合成过蔗糖,也用类似的方法合成过自然界不存在的 L-蔗糖(图1-2)。然而令人惊奇的是,L-蔗糖与自然界天然存在的D-蔗糖 一样甜。L-蔗糖与D-庶糖在立体化学上呈镜像关系,是由L-果糖和L-葡萄 糖缩合而成。重要的是,L-果糖和L-葡萄糖-样也是甜的。由于L-糖不参 与人体代谢,W此令人很感兴趣,只要经济上合算,就可作为新型功能性甜味剂 加以开发。
与【41蛋白有髙度同源性的109个氨基酸的多肽基W的阅读框架在与 RIM-C基因探针杂交的IX:域中。阅读框架中的起始密码子后即可能是367bP内 含子,据报道这是W1蛋白基因的一个特征。该内含子5,端和3,端的接合序列 分别为GTATGT和TAG,内部保守序列TACTAACA位于内含子3’端上游的31个 核苷酸。大多数核糖体蛋白质基因的上游区域布两个保守序列:H0- M0L1和RPG盒,RPG盒序列为ACACCCATACA (C/T) (A/T)。分离所得基因 在V上游有两个序列与RPG盒相近,序列一为ACACCCACCCACG (13个核苷酸 中10个相同),位于-197 ~ -179;序列二为ACACGCATACAAA (13个核苷酸 中丨1个相同),在非编码链上的-151 ~ -139。