西峰区阿力甜
以嗦吗甜基因中322bp Ncol片段作为探针，与九awamori基因组中的单拷贝 gdhA基因杂交的694bPPvuII片段作对照，对转化体进行DNA印迹杂交分析以估 计各转化体中嗦吗甜表达盒的数最。分析表明，在各转化体的表达盒没有发生重 排，各拷贝数为5~14 (表5-9),表达盒的拷贝数与嗦吗甜产率有明显的相 关性。
其中1997年，Kirin Co. ( Kanagawa,日本）的Kondo K等人的研究成果最为 引人注目。他们将人工合成的莫奈林基因克隆至产阮假丝酵母(CandUia utilis)细 胞内进行表达，莫奈林表达水平达到细胞可溶性蛋A的50%，莫奈林得率达 10mg/g湿酵母，该得率与从植物提取的最大得率相当，并且所得的莫奈林分离 纯化工艺非常简单，所用的C._7i5又是食用性酵母，因此采用该方法将能实现 英奈林的商业化生产，从而大大推进兑奈林的商业化开发进程。这里对该研究做 一介绍。
这些蔗糖衍生物的化学制备涉及许多步骤，通常为丨5 ~20多个反应，这不 可避免导?致产物得率比较低，因此以上提到的蔗糖衍生物的制备多数只存在理论 上的可能。但是通过进一步研究蔗糖衍生物的味觉品质，可以得出甜味分子结构 与甜度之间的关系。通过大鱼研究表明，蔗糖C-4、C-l\ C-4\ C-6'上任 何位置被卤素取代，所得蔗糖卤代衍生物甜度都比蔗糖强，而C-6上的取代则 可能导致甜味降低甚至产生苦味。
三芳基膦和四氣化碳合用是转变伯醉和仲醇成为相应的有机卤化物的有效试 剂。四氣化碳与三苯基膦反应，反应认为有碳烯中间体生成。ph,p + ca4~~*? [PhjP*—ca,] cr
环糊精葡糖基转移酶(CGTase)能将淀粉或环糊精的葡糖基经转葡糖苷作 用转移给其他糖元，因此，可用它催化淀粉或环状糊楮在甜菊苷的糖基上引入新 糖元。转葡糖基反应分2步进行：①由淀粉合成环糊精；②从环糊精转移葡糖 基至受体物质。
表S-19 仙茅蛋白提纯工艺
表4 -22 环状芽孢杆菌的-半乳糖苷酶催化
(四）酵母嗦吗甜的分析
然而，纽甜的实际消耗量会比这些估计的数字要小。当今市场上除阿斯巴甜 外，还有甜蜜素、安塞蜜、糖精钠等其他甜味剂。而许多产品混合使用了两种或 更多的甜味剂，而不是单一的添加阿斯巴甜，因此，纽甜的实际消耗最将会少于 在阿斯巴甜消耗世的基础上所作的预测。
